Fundacija histokemije, obdelava, obarvanje

The Histokemija To je zelo koristno orodje pri preučevanju morfologije različnih bioloških tkiv (zelenjave in živali) zaradi svojega načela reakcije tkivnih komponent, kot so ogljikovi hidrati, lipidi in beljakovine, med drugim z barvnimi snovmi.

To dragoceno orodje omogoča ne le prepoznavanje sestave in strukture tkiv in celic, temveč tudi različne reakcije, ki se pojavijo pri teh. Prav tako možne poškodbe tkiva, ki jih povzroča prisotnost mikroorganizmov ali drugih patologij.

Histokemično obarvanje. Virus Nila, gram pozitivne in gram negativne bakterije (Gram), histoplazma kapsulatum (Grocott), Mycobacterium tuberculosis (Ziehl Neelsen). Vir: Pixinio.com/wikipedia.org/nefron [cc by-sa 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licence/by-sa/3.0)]/CDC/DR. George P. KUBICA [javna domena]

Histokemija, saj je v preteklih stoletjih prispevala pomembne prispevke, kot je dokaz obstoja krvne celične pregrade Paul Ehrlich. To je bilo mogoče zahvaljujoč dejstvu, da možgani eksperimentiranja, ki jo uporablja Ehrlich, niso obarvali z anilinom, kar je osnovno barvilo.

To je privedlo do uporabe različnih barvil, kot sta metilen in indofenol modra, da bi barvilo različne vrste celic. Ta ugotovitev je povzročila klasifikacijo celic v acidofilnih, bazofilnih in nevtrofilih, glede na njihovo specifično obarvanje.

Nedavne študije so to tehniko uporabile za prikaz prisotnosti različnih spojin, vključno s fenoli, pa tudi ogljikovimi hidrati in ne -strukturnimi lipidi pri vrstah vrste Litsea glaucescens, Najbolj znana kot Laurel. Biti te, tako v listu kot v lesu.

Prav tako so Colares in sod Tarenaya Hasseriana, Skozi histokemične tehnike. Pri tej vrsti smo dokazali prisotnost škroba, Mirosine, pa tudi fenolne in lipofilne spojine.

[TOC]

Osnova

Histokemija temelji na obarvanju celičnih struktur ali molekul, ki so prisotne v tkivih, zahvaljujoč njihovi sorodnosti s specifičnimi barvili. Barvna reakcija teh struktur ali molekul v njihovi prvotni obliki je pozneje vizualizirana v optičnem mikroskopu ali elektronskem mikroskopu.

Specifičnost obarvanja je posledica prisotnosti skupin, ki sprejemajo ione, ki so prisotne v celicah ali tkivnih molekulah.

Nazadnje je cilj histokemičnih reakcij biti sposoben dokazovati z obarvanostjo. Od največjih bioloških struktur do najmanjših tkiv in celic. To je mogoče doseči zahvaljujoč dejstvu, da barvila kemično reagirajo z molekulami tkiv, celic ali organelov.

Lahko vam služi: kaj je preganjalo?

Pregon

Histokemična reakcija bi lahko privedla do korakov pred realizacijo tehnike, kot so fiksacija, vključitev in rezanje tkiva. Zato je treba upoštevati, da lahko v teh korakih poškodujete strukturo, ki jo želite prepoznati, in vržete lažno negativne rezultate, tudi če je prisotna.

Kljub temu je pomembna prejšnja fiksacija tkiva, saj preprečuje avtolizo ali uničenje celic. Za to.

Vključitev tkiva je narejena tako, da ohranja svojo čvrstost pri rezanju in tako prepreči, da bi se deformiralo. Končno je rez narejen z mikrotomom za preučevanje vzorcev z optično mikroskopijo.

Poleg tega je pred nadaljevanjem histokemičnega obarvanja priporočljivo vključiti zunanje ali notranje pozitivne kontrole v vsako serijo preskusov. Kot tudi uporaba specifičnih barvil za strukture za študij.

Histokemično obarvanje

Od nastanka histokemijskih tehnik do sedanjosti je bil uporabljen širok razpon barvil, med katerimi je najpogostejša uporaba, kot so: Schiff (PAS), Grocott, Ziehl-Neelsen in Gram.

Prav tako so bila druga barvila uporabljena manj pogosto, kot so kitajsko črnilo, Orcein ali Masson -ovo trikromsko obarvanje.

Schiffova periódinska kislina (PAS)

S to barvo si lahko ogledate molekule z visoko vsebnostjo ogljikovih hidratov, kot sta: glikogen in mucin. Vendar je koristna tudi za identifikacijo mikroorganizmov, kot so glive in zajedavci. Poleg nekaterih struktur (bazalna membrana) v koži in v drugih tkivih.

Temelj tega obarvanja je, da barvanje oksida ogljikove vezi, ki so prisotne med dvema bližnjima skupinama hidroksilov. To povzroči sproščanje skupine Aldehida, in to zazna Schiffov reagent, ki vrže vijolično barvo.

Reagent Schiffa sestavljajo osnovni fuchsin, natrijev presnovni in klorovodiko. V nasprotnem primeru nastane brezbarvna kislina.

Vam lahko služi: izomeraza: kaj je, funkcije, nomenklatura, tipi

Intenzivnost barvanja bo odvisna od količine hidroksilnih skupin, prisotnih v monosaharidih. Na primer pri glivah, bazalnih membranah, mucinah in glikogenu lahko barva preide iz rdeče do vijolične, jedra.

Grocott

To je eno od obarvanja, ki predstavlja največjo občutljivost pri identifikaciji gliv v tkivih, vključenih v parafin. To med drugim omogoča identifikacijo različnih glivičnih struktur: hife, spore, endospore. Zato se šteje za rutinsko obarvanje za diagnozo mikoze.

Še posebej se uporablja pri diagnozi pljučne mikoze, kot sta pnevmocistoza in aspergiloza, ki jo povzročajo nekatere glive žanrov Pnevmocisti in Aspergillus, oziroma.

Ta raztopina vsebuje srebro in kromično kislino, slednja pa je fiksativna in barvila. Temelj je, da ta kislina proizvaja oksidacijo hidroksilov do aldehidosa z mukopoli, ki so prisotni v izbranih strukturah, na primer v celični steni gliv.

Nazadnje srebro, ki je prisoten v raztopini, oksidirajo aldehidi, kar povzroči črno obarvanost, ki se imenuje reakcija argentafina. Uporabite lahko tudi kontrastna barvila, kot so svetlo zelena in s tem opazimo glivične strukture v črni barvi s svetlo zelenim ozadjem.

Ziehl-Neelsen

To obarvanje temelji na prisotnosti odpornosti na kislino in alkohola, delno ali skupno, v nekaterih mikroorganizmih, kot so žanri Nokardija, Legionella in Mycobacterium.

Uporaba tega obarvanja je priporočljiva, ker celična stena predhodno citiranih mikroorganizmov vsebuje zapletene lipide, ki ovirajo prodor barvanja. Zlasti v vzorcih dihalnih traktov.

V njem se uporabljajo močna barvila, kot je Fenicada fuchsin (osnovno barvilo) in nanesemo toplota, tako da lahko mikroorganizem zadrži barvilo in ne razbarva s kislinami in alkoholi. Končno se uporablja metilen modra raztopina za barvanje struktur, ki so bile razbarvane.

Prisotnost odpornosti na kislinsko in alkohol opazimo pri rdečih strukturah, medtem ko so strukture, ki se ne upirajo razbarvanju.

Gram in kitajsko črnilo

Gram je med drugim zelo koristna obarvanost pri diagnozi bakterijskih in glivičnih okužb. Ta obarvanost omogoča razlikovanje med gram pozitivnimi mikroorganizmi negativnega grama, kar jasno dokazuje razlike, ki obstajajo v sestavi celične stene.

Vam lahko služi: lipidi, ki jih je mogoče saponificirati: značilnosti, struktura, funkcije, primeri

Medtem ko je kitajsko črnilo obarvanje, ki se uporablja za kontrast struktur, ki vsebujejo polisaharide (kapsula). To je zato, ker se v okolju tvori prstan, ki je mogoč v Cryptococcus neoformans.

Orcein

S tem obarvanjem so obarvana elastična vlakna in kromosomi različnih celic, kar omogoča oceno postopka zorenja slednjih. Zaradi tega je bilo v citogenetskih študijah zelo koristno.

To temelji na zbiranju barvila z negativno obremenitvijo molekul, kot je DNK, ki so prisotni v središčih najrazličnejših celic. Torej so te barvane modre do temne vijolične.

Massonov trikrom

To obarvanje se uporablja pri identifikaciji nekaterih mikroorganizmov ali materialov, ki vsebujejo mellate pigmente. To je primer mikoze, ki jo povzročajo dematialne glive, ugohifomikoza in v črni zrni eumicetom.

Končni premisleki

V zadnjih letih je bilo veliko napredka pri ustvarjanju novih diagnostičnih tehnik, kjer je vključena histokemija, vendar povezana z drugimi fundacijami ali načeli. Te tehnike zasledujejo drugačen namen, kot je to pri imunohistokemiji ali encimohistokemiji.

Reference

1. Acuña u, Elguero J. Histokemija. An. Kem. 2012; 108 (2): 114-118. Na voljo pri: ARE.IQM.CSIC.je
2. Mestanza r. Pogostost histokemičnega obarvanja PAS, Grocott in Ziehl-Neelsen, ki se uporablja za identifikacijo mikroorganizmov, opravljeno v službi patološke anatomije v bolnišnici Eugenio Espejo Specialties. [Diplomska naloga]. Centralna univerza v Ekvadorju, Quito; 2016. Na voljo na: DSPACE.Uce.Edu
3. Tapia-Torres N, De La Paz-Pérez-Olvera C, Román-Guerrero A, Quintanar-Isaías A, García-Márquez E, Cruz-Sosa F. Histokemija, skupna vsebnost fenolov ter aktivnost antioksidantov listov in lesa Litsea glaucescens Kunth (Laureaceae). Les in gozdovi. 2014; 20 (3): 125-137. Na voljo na: Redalyc.org
4. Colares, MN, Martínez-Alonso, S, Arambarri, Am. Anatomija in histokemija Tarenaya Hassleriana (Kleomaceae), nekakšen zdravilni interes. Latinskoameriški in karibski bilten zdravilnih in aromatičnih rastlin 2016; 15 (3): 182-191. Na voljo na: Redalyc.org
5. Bonifaz a. Osnovna medicinska mikologija. 4. izdaja. Mehika: medsebojni uredniki McGraw-Hill, S.Do. od c.V. 2012.
6. Silva Diego Filipe Bezerra, Santos Hellen Bandeira de Pontes, León Jorge Esquiche, Gomes Dalian. Klinična patološka in imunohistokemična analiza vretenalnega celičnega karcinoma jezika: redek primer. Einstein (São Paulo) 2019; 17 (1): ERC4610. Na voljo pri: Scielo.Br