Fundacija Peptonada, priprava in uporaba

On voda peptonada To je sredstvo za obogatitev tekočine, ki ni selektivna, v glavnem se uporablja kot redčenje vzorcev hrane ali drugih materialov. To pomeni, da je s kemičnega vidika zelo preprost, vsebuje peptone mesa, natrijevega klorida in vode.

Ima nekaj prehranske vrednosti, kar omogoča obogatitev vzorca. Če obstajajo bakterije, ima ta medij moč popraviti sposobnost preživetja. Posebej je koristen pri okrevanju bakterij, ki pripadajo družini Enterobacteriaceae.

Voda peptonada v kozarcih. Vir: MSC. Marielsa Gil

V primeru obnovitve Salmonellasa je priporočljiva uporaba variante vode Peptonada voda; To služi kot sredstvo za prednastavitev vzorca, v tem primeru vsebuje druge elemente, kot sta disótični fosfat in dipotassijev fosfat.

Običajno voda peptonada pripravlja nevtralni pH, vendar obstajajo tudi druge različice, pri katerih je za pH 8,5 ± 0,2 (alkalen), ker so bakterije, ki so namenjene izolaciji, alkalofil Vibrio kolere.

Po drugi strani se ta medij lahko uporablja kot osnovni medij za preskuse fermentacije ogljikovih hidratov.

[TOC]

Osnova

Peptonani zagotavljajo hranila, potrebna za razvoj bakterij, zlasti aminokisline dušika in kratke verige, medtem ko natrijev klorid ohranja osmotsko ravnovesje.

Poleg tega medij omogoča razprševanje, homogenizacijo in popravljanje bakterijskih celic, ki so jih poškodovali s predložitvijo industrijskih procesov.

Ker je redčenje idealno, učinkovito nadomešča fiziološko raztopino (SSF) ali raztopino za dušenje fosfata (PBS).

Rast bakterij postane razvidna z opazovanjem motnosti istega.

Priprava

Domača (nekomercialna) priprava

Tehtamo 1 gr peptona in 8,5 gr natrijevega klorida, se raztopi v 1 liter destilirane vode. PH mora biti prilagojen na 7,0. Za to lahko uporabite natrijev klorid 1 n.

Vam lahko služi: prehodni pridelki

Priprava z uporabo komercialnega medija

Tehtamo 15 gr dehidriranega medija in se raztopimo v litru destilirane vode. Homogenezirajte mešanico. Če je potrebno, zmes kuhamo 1 minuto, da pomagamo v celotni raztopini. Po potrebi postrezite v 100 ml kozarcev ali 10 ml cevi. Autoclavar pri 121 ° C 15 minut.

Ohladite in uporabite v hladilniku. Končni pH medija je 7,2 ± 0,2.

Barva dehidriranega medija je lahka in pripravljena bež je jasna jantarna.

Priprava na fermentacijske teste

Do prejšnje priprave - po sterilizaciji - je treba dodati ogljikovo hidrat v končno 1%koncentracijo, poleg tega pa indikator andrade (kisli fuchsin) ali rdeči fenol (0.018 G/L). Cevi je treba namestiti Durham Bell za opazovanje tvorbe plina.

Druge variante vode Peptonadada

-Bufedirana voda peptonada

Ta vsebuje encimski kazein hidroliziran, natrijev klorid, dihidrogeni fosfat kalija in vodikovega natrijevega dodekahidrata natrijevega fosfata. Končni pH je 7,0 ± 0,2.

Za pripravo tehtajte 20 gr dehidriranega medija in se raztopimo v 1 liter destilirane vode. Pustite približno 5 minut. Segrejte za 1 minuto, dokler se popolnoma ne raztopi.

Prelijemo zadostne kozarce glede na potrebo. Sterilizirajte s pomočjo avtoklava pri 121 ° C 15 minut.

-Alkalna voda peptonada

Tehtamo 25 gr dehidriranega medija in se raztopimo v 1 liter vode. Nadaljujte, kot je opisano zgoraj. PH se giblje od 8,3 do 8,7.

Uporaba

Inokulum se opravi tako, da vzorec postavimo neposredno.

Uporablja se za redčenje vzorcev, še posebej, če se sumi, da so lahko poškodovane bakterije. Na splošno so redčenja 1:10 in 1: 100.

Vam lahko postreže: zakaj glive ne pripravijo svoje hrane?

Inkubira se 24 ur v aerobiozi pri 35-37 ° C.

Vzorci blata

Za vzorce blata v iskanju salmonele se priporoča uporaba puferirane ali puferirane vode kot sredstvo pred Enrique.

Če želite to narediti, nadaljujte na naslednji način:

Če so iztrebki oblikovane za 1 gr vzorca. Če so tekoči, vzemite 1 ml blata in suspendirajte v cevi z 10 ml puferirane peptonada vode. V primeru rektalnih brisov prenesite gradivo, ki ga vsebuje bris v cevi s peptonadano puferirano vodo.

V vseh primerih zelo dobro zmešajte in homogenizirate.

Inkubirajte pri 37 ° C 18 do 24 ur. Pozneje subkulturni v obogatitveni juhi kot cistina selenito ali tetracijske juhe pri 37 ° C 18-24 ur več. Končno rastete v selektivnih medijih za salmonelo, kot so agar ss, agar xld, hektoen agar.

Vzorci hrane

Voda peptonada se uporablja kot sredstvo za obogatitev ali kot preprost razredčenje, če pa se iščejo vrste salmonele.

V hrani nadaljujte na naslednji način:

Za trdno hrano obžalovanje 25 gr vzorca in za tekočo hrano izmerite 25 ml istega. Ta del postavite v kozarce, ki vsebujejo 225 ml vode peptonada. Mešajte in homogenizirajte vzorec.

Če se sumi, da je mikrobna obremenitev visoka, se lahko izvede serijska ali decimalna redčenja, da se olajša število kolonij, ki tvorijo enote (UFC).

Število redčenj bo odvisno od vrste vzorca in analitične izkušnje.

Če na nasprotno sumimo, da je mikrobna obremenitev zelo nizka, ni treba izvesti redčenja. Kasneje subjektivno v selektivnih medijih.

Lahko vam služi: Katalaza: značilnosti, struktura, funkcije, patologije

V primeru hrane z morja, kot so morski sadeži, ribe, med drugim v iskanju Vibrio kolere ali druge vrste vibrio, voda peptonada, prilagojena pH 8,5 (alkalna voda peptonada) (alkalna peptonada).

QA

Iz vsake pripravljene parcele je treba inkubirati dve cevi brez inokuliranja 24 ur v aerobiozi pri 37 ° C. Čas je konec, motnost ali spremembe barve ne smete opaziti.

Znane kontrole se lahko uporabijo tudi za oceno njegove učinkovitosti:

Za to lahko uporabite naslednje bakterijske seve: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 8927, zlati stafilokok ATCC 6538, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella tiphimurium ATCC 1428, Salmonella Enteritidis ATCC 13076.

V vseh primerih se pričakuje zadovoljiv mikrobni razvoj, ki ga opazimo z motnostjo okolja.

Omejitve

-Dehidrirani medij je zelo higroskopski, zato ga je treba držati stran od vlage.

-Medij ne smemo uporabljati, če opazimo kakršno koli poslabšanje.

-Dehidrirani kulturni medij je treba hraniti med 10 - 35 ° C

-Pripravljeni medij je treba hraniti hladilno (2-8 ° C).

Reference

1. Camacho A, Giles M, Ortegon A, Palao M, Serrano B in Velázquez ali. Tehnike za mikrobiološko analizo hrane. 2009, 2. izd. Kemijska fakulteta, UNAM. Mehika. Različica za skrbnika ročnega in dokumentov (AMYD) na fakulteti za kemijo, UNAM 1. Na voljo na: http: // depa.Fquim.Ne.mx
2. Britanski laboratoriji. Bufedirana voda peptonada. 2015. Na voljo na: Britanaalab.com
3. Neogen laboratoriji. Voda peptonada. Na voljo na: FoodSafety.Neogen.com
4. Britanski laboratoriji. Voda peptonada. 2015. Na voljo na: Britanaalab.com
5. Merck Laboratories. Peptonada puferna voda. Na voljo na: Merckmillipore.com
6. Conda Laboratories. Alkalna voda peptonada. Na voljo na: Condalab.com
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 ed. Pan -ameriški uredništvo s.Do. Argentina.