Fundacija hektoen, priprava in uporaba

On Haktoen agar o Enter agar hektoen je trden, selektiven in diferencialni kulturni medij. Na inštitutu Hektoen sta ga ustvarila King in Metzger zaradi izolacije enteropatogenih bakterij Shigella in Salmonella.

Medij je sestavljen iz peptonskih beljakovin, ekstrakta kvasa, žolčnih soli, laktoze, saharoze, salicina, natrijevega tiosulfata, natrijevega klorida, železnega citrata, amonijevega citrata, bromoolskega modrega, kislega fuchsina in agar in agar. Ta formulacija omogoča razlikovanje žanrov Shigella in salmonele od preostalih bakterij, ki lahko rastejo v tem mediju.

Do. Hektoen virgen b ague b. Haktoen agar posejan. Vir: Flickr.com/originalni nalagalec je bil Philippinjl na francoski Wikipediji. [CC BY-SA 2.0 fr (https: // createCommons.Org/licence/by-sa/2.0/fr/Deed.v)]

Čeprav obstajajo drugi mediji z enako funkcijo kot hektoen agar, ima to večjo prednost v primerjavi z drugimi mediji, še posebej, če želijo obnoviti vrste Shigella.

Vrste obeh rodov povzročajo hude težave s prebavili v človeku zaradi uživanja onesnažene hrane; Zato je menjalnik fekalni - ustni. Zato je uporaba hektoen agarja v glavnem navedena v mikrobiološki analizi iztrebkov in vzorcev hrane.

[TOC]

Osnova

Hektoen agar vsebuje peptone in ekstrakt kvasovk kot vir hranil, ki zagotavlja bistvene elemente za razvoj mikrobov.

Vendar pa ima tudi žolčne soli, ki zavirajo rast nekaterih bakterij, zlasti gram pozitivno in nekaj grama negativnih. Zaradi tega velja za selektiven medij.

Po drugi strani je hektoen agar diferenčni medij. To lastnost je dana s prisotnostjo fermentiranih ogljikovih hidratov, kot so laktoza, risanje in salicin, poleg sistema indikatorja pH, ki jih predstavljata bromotimol modra in kisli fuchsin.

Vam lahko služi: sistonetia

Vse bakterije, ki lahko rastejo v tem mediju, ki ne pripadajo rodu Salmonella in Shigella, bodo razvile lososove ali oranžne kolonije, razen rodu Proteus. To je posledica fermentacije enega ali več prisotnih ogljikovih hidratov, ki zakimava medij, zaradi česar se pH indikator obrne.

Po drugi strani rod Shigella in Salmonella ne moreta fermentirati nobenega od prisotnih ogljikovih hidratov, pri čemer uporabljajo samo peptone kot vir energije, ki alkalizira medij, zato so njihove kolonije zeleno-modre.

Tudi v tem mediju lahko v tem mediju ločimo bakterije, ki lahko tvorijo vodikov sulfid (brezbarven plin). Natrijev tiosulfat deluje kot vir sulfida, medtem ko je železni citrat razkrivajoči sredstvo. Obe spojini omogočata nastanek črne oborine železovega sulfida, ki prikazuje reakcijo.

Črna oborina v središču kolonije s prozorno halo naokoli daje videz ribjega očesa. Ta funkcija kaže na prisotnost žanra salmonele.

Končno natrijev klorid vzdržuje osmotsko ravnovesje in agar zagotavlja trdno doslednost okolju.

Priprava

Tehtamo 76 gr dehidriranega medija in se raztopimo v litru destilirane vode. Pazite na mešanico in nato odpustite v mirovanju 10 do 15 minut. Lahko se segreje in vre, da se premikajo vrtljive premike do njegovega skupnega raztapljanja. Ta medij ni steriliziran v avtoklavi.

Ko medij doseže približno temperaturo 45 ° C.

Vam lahko služi: dinamika prebivalstva

Agar se utrdi. Takrat so že pripravljeni za uporabo. Priporočljivo je, da jih takoj uporabite. Če ni mogoče, jih hranijo v hladilniku do uporabe.

Plošče je treba vnaprej odstraniti iz hladilnika, preden jih sejate, da vzamejo temperaturo okolice.

Srednji pH mora biti 7,5 ± 0,2. Barva dehidriranega medija je vijolična in pripravljena barva je rjavo zelena.

Uporaba

Uporaba hektoen agarja je priporočljiva za iskanje bakterij rodu Shigella in Salmonela v vzorcih hrane in hrane.

Možnost izolacije teh bakterij se znatno poveča, če je vzorec v posebnih juhah prej obogaten.

Inokulum mora biti močan, sajenje. Plošče inkubiramo pri 37 ° C 24 do 48 ur v aerobiozi.

Inkubacija 48 ur je priporočljiva, ker so značilnosti kolonij v tem trenutku jasnejše za razlago in diferenciacijo.

QA

Za izvajanje nadzora kakovosti na tem mediju se uporabljajo certificirani bakterijski sevi, kot so: Salmonella tiphimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Shigella Flexneri ATCC 12022 in Shigella Sonnei ATCC 25931.

Pričakovani rezultati so naslednji: Salmonella tiphimurium in  Salmonella Enteritidis Razviti morajo zelene - modrikaste kolonije s črnim centrom ali brez njega. Medtem ko bodo vrste Shigella rasle kot zelene - modrikaste kolonije.

Vključite lahko tudi seve Escherichia coli ATCC 29212, Proteus mirabilis, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Enterococcus faecalis ATCC 29212 in zlati stafilokok ATCC 25923.

Vam lahko služi: juha laktosado

V teh primerih so opažene značilnosti naslednje: In. coli in K. pneumoniae V teh srednjih kolonijah se bodo razvili barvni losos do oranžne barve, z oborino iste barve naokoli. Medtem ko bo Proteus razvil modro-zelene kolonije s črnim centrom ali brez njega.

Medtem S. aureus in  In. Faecalis Včasih morajo biti zavirani In. Faecalis uspe rasti kot rumene, zelo majhne kolonije.

Po drugi strani, ker ta medij ni steriliziran v avtoklaviranju, je pomembno oceniti sterilnost medija. Zato jih je treba iz vsake pripravljene parcela inkubirati iz ene do dveh plošč, ne da bi 24 ur v aerobiozi inokulirali 37 ° C.

Očitno se pričakuje, da na plošči ni rasti.

Omejitve

-Vrste Proteus se lahko razvijejo v tem mediju in značilnosti njihovih kolonij je mogoče zamenjati s salmonelo ali vrstami Shigella. Zaradi tega je treba vsako sumljivo kolonijo potrditi z biokemijskimi testi.

-Uporaba tega medija je treba spremljati z drugimi manj selektivnimi starostmi, ker če je iskani mikroorganizem v nizkih koncentracijah, se v tem mediju ne bi mogel razviti.

-Med pripravo se ne pregrejte, saj prekomerna toplota spremeni sestavo okolja.

-Nenavadno se lahko pojavijo nenavadno kolonije laktozne fermentirane salmonele, ki lahko ostanejo neopažene.

Reference

1. Sodelavci Wikipedije. Hektoen Enterric Agar. Wikipedia, brezplačna enciklopedija. 13. marec 2019, 23:38 UTC. Na voljo na: .Wikipedija.Org/ Accessted 16. marca 2019.
2. BD laboratoriji. BD Hektoen Enterric Gang (on gank). 2013. Na voljo na: BD.com
3. Britanski laboratoriji. Hektoen entérico agar. 2015. Na voljo na: Britanaalab.com
4. Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Haktoen agar. Na voljo na: F-SORIA.je
5. DIFCO & BBL Priročnik, Hektoen Enterric Agar. 2. izdaja. Na voljo v: BD.com/Evropa