Safraninske značilnosti, uporaba, tehnike, strupenost

The Safranin To je merikinoidno barvilo, imenovano za posedovanje v svoji kemični strukturi 2 benzenskih obročev in 2 kinoidnih obročev, slednje pa so tiste, ki zagotavljajo rdečo barvo.

Imenuje se tudi safranin ali osnovni rdeč dimetil v svoji povzetki, saj je njegovo znanstveno ime 3,7-diamino-2,8-dimetil-5-fenil-fenil-fenil_dvajsetH₁₉N₄ Cl.

Kemična struktura safranina, ki kaže na benzenske in kinoidne obroče/ vodno raztopino safranina. Vir: Neurotoger [Public Domain] Uredil MSC. Marielsa Gil/lhchem [cc by-sa 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licence/by-sa/3.0)]

Obstaja varianta, imenovana trimethyle-safranin, vendar med obema snovmi ni bistvene razlike.

Safranin je enobarvno barvilo in po značilnostih kemijske formule je snov s pozitivnim nabojem. Zato ima naklonjenost z negativno obremenjenimi strukturami. Te strukture bodo barvane rdeče.

Ta lastnost daje uporabnost v številnih histoloških tehnikah za barvanje različnih celičnih struktur, tako iz evkariontskih kot prokariotskih organizmov.

Safranin se uporablja kot kontrastno barvilo v pomembnih in dobro znanih tehnikah rutinske uporabe v bakteriologiji. Te tehnike so: Gram-Huckerjevo obarvanje, med drugim obarvanje Schaeffer Fulton za spore ali bakterijske kapsule.

[TOC]

Značilnosti

Barva žafrana (začimbe, pridobljene iz stigme rože Crocus sativ) je bil navdih za postavitev imena tega barvila. Iz izraza žafran prihaja ime safranina. To je posledica velike podobnosti med barvo žafrana in obarvanostjo, ki jo zagotavlja ta barvilo.

Safranin dosežemo kot kristali ali prah, obe predstavitvi sta topni v vodi. Barvilo safranina nima vonja. Obarvane rdeče strukture. Strukture, ki pritegnejo safraninsko barvilo, se imenujejo safranofili.

Strukturno je safranin zapleten, do konca ima dva benzenski obroč, v sredini⁺. Središče strukture je sistem, ki je odgovoren za zagotavljanje barve. Po tej značilnosti je to barvilo razvrščeno v kategorijo II.

Uporaba

Safranin se uporablja za barvanje različnih struktur. Zlasti poudarja Kulchitskyjeve celice, ki so prisotne v prebavilih, imenovane tudi enterokromofinske celice.

Lahko barvanje mikroorganizmov, ki pripadajo družini Rickettsiaceae. Prav tako se uporablja v različnih tehnikah, kot je Kosterjeva metoda, spremenjena, ki se uporablja za obarvanje spolnih bakterij Brucella.

Po drugi strani se safranin uporablja v tehniki obarvanja Schaeffer Fulton spore in pri obarvanju Gram-Huckerja. V obeh tehnikah safranin deluje kot kontrastno barvilo.

Vam lahko služi: indijski

V prvem spore vzamejo barvo zelene malahita, preostale strukture. V drugem, gram negativne bakterije izgubijo barvo vijoličnega stekla v koraku razbarvanja, zato je safranin tisti, ki obarva gram negativne bakterije rdečih.

Poleg tega se v bakteriologiji uporablja safranin za pripravo brucelle agarja z redčenjem 1: 5000 safranina. Ta medij služi za razlikovanje vrste Brucella Suis preostale vrste. Brucella melitensis in Brucella abortus raste v tem mediju, vendar B. suis Zavira.

Na agroindustrijskem polju je bil safranin uporabljen na 2,25% in razredčen 1:10 za barvanje vzorcev stebel iz rastline sladkornega trsa.

Na to rastlino običajno vplivajo bakterije Leifsonia xyli Pod. Xyli, ki poškoduje ksilemo rastline. Ocenjena barvana stebla se ocenjujejo za določitev funkcije žil ksilema.

Tehnike na področju bakteriologije

Castañeda obarvanje za r madežIckettsias

Razmaz krvi ali tkiva je nameščen v pufersko raztopino (pH fosfatnega dušenja pH 7,6). Puščen se, da se spontano posuši in nato 3 minute prekriva z metilen modrim. Rickettsias obarvano modro, v nasprotju z rdečim ozadjem.

Spremenjeno obarvanje Kosterja za Brucella

Razmaz se izvaja in v vžigalniku za fiksacijo flamea. Nato je 1 minuto pokrit z mešanico 2 delov nasičenega vodnega safranina s 3 deli koh 1 mol/l raztopine. Izvaja se pranje z destilirano vodo in 1% fenado metilen modra.

Če vzorec vsebuje spolne bakterije Brucella Te bodo opazili oranžno v modrem ozadju.

Obarvanje bakterijskih kapsul

Izvede se mešanica bakterijske suspenzije s kitajskim črnilom in doda safranin. Na mikroskopu okoli vsake bakterijske kapsule s črnim ozadjem bomo opazili rdečkast halo.

Vam lahko služi: čiste snovi

Obarvanje spor Schaeffer Fulton

Izvede se z bakterijsko suspenzijo. Potem je pritrjen za ogrevanje. Pokrit je s 5%malahitno zeleno, pogosto plamenja do emisije hlapov. Postopek se ponavlja 6-10 minut. Končno ga operemo z vodo in 30 sekund najemo z 0,5% safranina. Bacili so barvani rdeči in zelene spore.

Gram-hucker obarvanje

Izvedeno z bakterijsko suspenzijo se izvede in pritrdi na toploto. Lamina z vijoličnim steklom do 1 minute je pokrita. Nato Lugol postavimo kot mordant raztopina na 1 minuto. Nato je obarvan z acetonskim alkoholom in na koncu najet s safraninom 30 sekund.

Gram pozitivne bakterije so barvane modro vijolične in gram negativne bakterije rdečih.

Nekateri laboratoriji so prenehali s tehniko Gram-Hucker za sprejemanje spremenjene tehnike Gram-Kopeloff. V slednjem je safranin nadomeščen z osnovnim fuchsinom. To je zato, ker safranin šibko obarva vrste rodov Legionella, Campylobacter in Brucella.

Tehnike na območju histologije

Obarvanje celic Kulchitsky (enterokromofini)

Tkivne reze prebavil s srebrnim kloridom se barvajo. Potem je obarvan z natrijevim tiosulfatom in na koncu najet s safraninom.

Kulchitsky celice se razlikujejo, ker so predstavljene s črno rjavimi zrnci.

Obarvanje za odkrivanje osteoartritisa

Safranin, ker ima pozitivno obremenitev, karboksi in sulfatne skupine glikozaminoglikanov se zelo dobro vežejo. Ti so del proteoglikanov, ki predstavljajo artikularni hrustanec. V tem smislu, ko barvanje s safraninom ali pa je mogoče ugotoviti, ali pride do izgube hrustanca ali ne.

Izgubo hrustančnega tkiva lahko merimo skozi Mankinovo lestvico ali imenujemo tudi lestvico osteoartritisa.

Nato je razložena tehnika: histološki rez je potopljen v pladenj z Weigertovo raztopino železovega hematoksilina.

Nadaljujte postopek obarvanja tako, da pločevine potopite v hitro zeleno, se spere z ocetno kislino in zdaj potopite v safranin ali. Za zaključek postopka se dehidrira z alkoholi v različnih koncentracijah v naraščajočem vrstnem redu. Zadnji korak zahteva Xileno ali Xilol, da vzorec pojasni.

Vam lahko služi: metaloidi

Listi so pogojeni s kanadskim balzamom ali podobno, da jih opazimo na mikroskopu. 

S to tehniko so jedra barvana črna, zelena kost in hrustanec, kjer najdejo rdeči proteoglikani.

Thincion za identifikacijo makroalg

Pérez in drugi leta 2003 so predlagali preprosto in ekonomično tehniko za barvanje makroalg. Vzorci se pripravijo v histoloških rezih s parafinom. Rezi so postavljeni z 1% glicerinom, ki se popolnoma sušijo. Nato ga postavimo v ksilol, da se odpravi parafin.

Rez je rehidriran, zaradi česar se prehaja skozi vrsto pladnjev, ki vsebujejo etanol v različnih stopnjah koncentracije (padajočega vrstnega reda), za 2 min v vsaki.

Nato ga pobarvamo 5 minut z 3: 1 mešanico 1% safranina z 1% toluidinsko modro, oba pripravljena s 50% etanolom. Mešanici dodamo tri kapljice picrične kisline, ki deluje kot mordant.

Potem postane spet dehidrirano skozi alkoholne pladnje, vendar se tokrat vzponi. Končno je razjasnjen s Xilol in vzorec je pripravljen s kanadskim balzamom, ki ga je treba opaziti.

Strupenost

Na srečo je safranin barvilo, ki ne predstavlja nevarnosti za tiste, ki z njim manipulirajo. Je neškodljivo barvilo, ni rakotvorno in tudi ni vnetljivo.

V neposrednem stiku s kožo ali sluznico lahko brez večjih zapletov povzroči rahlo pordelost območja. Za to je priporočljivo, da prizadeto območje izperete z veliko vode.

Reference

1. Garcia h. Safraninsko barvilo oz. Zdravstvena tehnika, 2012; 1 (2): 83–85. Na voljo na: Medigrafski.com
2. Gil m. Gramovo obarvanje: Temelj, materiali, tehnika in uporabe. 2019. Na voljo na: Lofede.com
3. Gil m. Obarvanje sporov: Tehnike, tehnike in uporabe. 2019. Na voljo na: Lofede.com
4. Safranin." Wikipedia, brezplačna enciklopedija. 7. marca 2017, 10:39 UTC. AGO 2019, 20:49 je.Wikipedija.org
5. Pérez-Cortéz S, Vera B, Sánchez C. Uporabna tehnika obarvanja v anatomski interpretaciji Grafiliasis tenuifrons in Gracilaria chilensis (Rhodophyta). Bot dejanje. Venez. 2003; 26 (2): 237–244. Na voljo na: Scielo.org.
6. Aleika Church, Peralta Esther Lilia, Alvarez Elba, Milián J, Matos Madyu. Razmerje funkcionalnosti ksilemskih žil in prisotnosti Leifsonia xyli subp. Xyli. Rev. Zaščita zelenjave. 2007; 22 (1): 65–65. Na voljo na: Scielo.Sld