Orceína Foundation in priprava

The Orcein Je naravno vijolično barvilo, ekstrahirano iz različnih lišajev, kot so: orhilla ali jerhilla, plodni lišaji, Rocella Tincoria in Parella Lecanora večinoma. The Rocella Tincoria Najdemo ga na afriški in ameriški celini, čeprav jo lahko nadomestijo druge vrste v Evropi.

To barvilo se že od antičnih časov pogosto uporablja v citogenetskih študijah. V tem smislu je priprava Orceina, ki vključuje ocetno kislino, uvedel Lacourt leta 1941, zato se je sprva imenovala Lacourt Technique.

Kemična struktura raztopine Orcein in Orcein. Vir: Wikipedia.Org/ oguenter pri.Wikipedia (dr. Guenther) [javna domena]

Prav tako se je zaradi svoje preprostosti in nizkih stroškov uporabljala za proizvodnjo likmusa (barvanje, ekstrahirano iz lišajev) in v histoloških študijah (obarvanje celic in tkiv).

Več raziskav je uporabilo to obarvanje v kombinaciji z drugimi kemikalijami, kot sta amoniakalna picrocarminat in ocetna kislina, za barvanje elastičnih vlaken in kromosomov. Trenutno ORCEIN še vedno uporablja v citogenetskih študijah živali in zelenjave.

Pred kratkim sta Silva in sod. 2017 je to obarvanje uspešno uporabil za opazovanje različnih sprememb, ki se pojavljajo v elastičnih vlaknih kože palca pri čilskih starejših odraslih. Ta študija je razkrila, kako se vlakna palca spreminjajo s staranjem.

V tem smislu so elastična vlakna opazila barvo rjavega negruzca pri posameznikih, starejših od 80 let; Medtem ko jih je v najmlajših (od 60 let) videti z rdečkasto rjavo. Citoplazma in druge celične strukture postanejo rumenkasto zelene.

To je omogočilo potrditev prisotnosti in stanja elastičnih vlaken v smislu njihovega razpolaganja, količine in celovitosti. Po drugi strani je tudi poudarjeno, da je Orcein koristen za prepoznavanje anevrizme in diagnosticiranje arteritisa, med drugim.

[TOC]

Osnova

Orcein je del oksazinske skupine barvil in obarvanje temelji na njeni afiniteti do DNK. Barvilo se pridruži negativni obremenitvi te molekule, ki jo predstavlja fosfatna skupina. Zato so kromosomi barvani vijolični.

Lahko vam služi: Alilo: Aluična enota, karbokacija, radikalni, primeri

Vendar preostale celične strukture vzamejo drugo barvo. Konkretno, v primeru elastičnih vlaken so ta obarvana z rdečkasto rjavo barvo, celična jedra iz modre vijolične modre, medtem ko kolagen ni pobarvan.

Zato se Orcein uporablja za barvanje kromatina in razlikovanje seksa pri nekaterih muhah. Prav tako so lahko jedra in nekatere vključitve jeter, ki jih proizvajajo antigeni hepatitisa B.

Orcein rešitve imajo posebne funkcije pri obarvanju. Orcein A, ima funkcijo mehčanja celičnih membran, kar povzroča njihovo smrt in paralizira proces delitve istega. Medtem je Orcein B odgovoren za dokončanje barve za oprijem kromosomov.

Priprava

1% raztopina aceto-orceina

Za pripravo 1% rešitve-orceina.

Nato se nenehno meša, da homogenizira raztopino, pozneje pusti, da se stoji, dokler se ne ohladi. Končno je 4 ° C shranjeno v temnih kozarcih. To pripravo je Flores 2012 uporabil za opazovanje faz zorenja kravjih oocitov.

V tem primeru je na primer raztopina aceto-orceina na tkivu, ki je bila predhodno pritrjena v ocetno-stanolski kislini 24 ur. Ta postopek obarvanja se izvaja 30 minut, nato pa je tkanina podvržena razbarvanju.

Prav tako je to mogoče uporabiti pri identifikaciji organelov v večceličnih tkivih. V tem primeru se barva razmaza ustne sluznice s kapljico raztopine aceto-orceina, pokrivanje je nameščeno na listu in takoj lahko opazimo celično jedro.

Lakto-raztopina raztopine Orcein 1%

Poleg tega lahko Orcein pripravimo z drugimi kemikalijami, kot so mlečna kislina in propionska kislina. Če želite to narediti, se gram Orceina raztopi v pred -okolju pri sobni temperaturi 23 ml mlečne kisline in 23 ml propionske kisline; Dopolnjevanje volumna z destilirano vodo do 100 ml.

Vam lahko služi: terciarni alkohol: struktura, lastnosti, primeri

S to lakto-propionsko raztopino Orceína lahko vidite različne faze mejotske delitve rastlinskih celic. V tem primeru se predhodno prednostni in hidroliziran vzorec postavi 15 minut v lakto-propionski raztopini Orceina in nato tkivo razširi v rezine diapozitivov.

V študiji Duke 2016 o politenskih kromosomih je uporabil pripravo 2 grama oriceina, razredčenega v ocetni kislini, in 85%mlečne kisline, razredčeno s 65%raztopino ocetne kisline. Nazadnje je opazoval kromosome v slinavskih žlezah Drosophila melanogaster.

Orcein A in Orcein B

Pomembno je upoštevati, da je odvisno od vzorca in tega, kar želite oceniti, pripravljena ustrezna rešitev Orceina. Tako na primer oriceinsko raztopino A dodamo 1N klorovodikovo kislino za opazovanje delitvenih celic.

Medtem ko raztopina Orceina B konča raztapljanje v 45% ocetni kislini. Ta tehnika predstavlja skrajšano metodo obarvanja in se na splošno uporablja kot dopolnilo za barvne kromosomske strukture.

Končni premisleki

V preteklih stoletjih, v državah ameriške celine kot Argentina, lahko dobite lišaje, kot so: Lecanora, Parmelia in UmBILICARIA, ki so odlični viri Orceina. Tudi evropska območja, kot so Kanarski otoki, so bila takrat velika proizvajalci Orhile.

To je bilo izvoženo v druga mesta na isti celini, kot je Genova in države, kot je Anglija. Torej se je ta lišaj pozneje zmanjšal, dokler se ne bo ugasnil.

To je privedlo do Orhile, ki so bile nadomeščene z drugimi rastlinami z barvilnimi lastnostmi. Vendar je pojav sintetičnih barvil prispeval k zaključku tega vira licence Orcein.

Vam lahko služi: aluminijev karbonat: struktura, lastnosti, uporabe

To je bilo mogoče zahvaljujoč COCQ, ki je leta 1812 opisal sintezo Orceina, saj je vedel, da je to sintetizirana s fenolno spojino, imenovano Orcinol. Kljub temu pa je naravni Orcein še vedno najljubši.

To je lahko posledica dejstva, da je Orcinol zelo močna vonjska spojina in katerih dolgotrajna izpostavljenost bi lahko privedla do zdravstvenih tveganj, kot je izguba sposobnosti odkrivanja vonjav. Te odškodnine na hipofizo bi se lahko premaknile od začasnega do trajnega, višja razstava.

Reference

1. ORTEGA L, GARCía R, Morales c. „Uporaba lakaz, ki jih proizvajajo glive za razgradnjo mikrobioloških barvil (Orcein in Vijolični kristal)."Mladi v znanosti 2. 2015; 633-637. Na voljo na: Youngen.Ugto.mx.
2. Barcat J. Orcein in elastična vlakna. Medicina (Buenos Aires) 2003; 63: 453-456. Na voljo na: Medicinabuenosaires.com.
3. Silva J, Rojas M, Araya C, Villagra F. Histološke značilnosti kože obraza letijo pri čilskih posameznikih z zbledelom daktilograma. J. Morfol. 2017; 35 (3): 1107-1113. Na voljo na: Scielo.Conicyt.
4. Orrillo M, Merideth B. "Reproduktivna in citogenetska biologija krompirja.”Mednarodni center krompirja (CIP). Tehnični priročnik. Na voljo pri: Raziskave.KIP.Cgiar.org/
5. Rože f. "Gojenje in zorenje In vitro, krav oocitov (Bos Taurus) V bolivijskem altiplanu."[Magistrska naloga]. Nacionalna univerza v Altiplanu, Puno-Peru; 2012. Na voljo na: Repozitorij.en p.Edu.pe.
6. Vojvoda c. Polinični kromosomi: pogled na pojav endoredijske aplikacije. Nacionalna univerza v Kolumbiji, Medellín; 2016. Na voljo na: EDU.
7. Camarena f. Celična in molekularna biologija. Priročnik za vadbo. Avtonomna univerza v Baja Kaliforniji. 2017. Na voljo na: Ribe.In en.UABC.mx.
8. FAO/oiea. 2018. Ročno za razlikovanje muh od Anastrepha Ludens (Loew) Silvestres in običajne služkinje ("bi-seksualne") in gensko spolni sev (tapachula-7), obsevano in brez iradiarja. Guillen Aguilar J.C, López Muñoz L, López Villalobos in.F in Soto García D. N. Organizacija Združenih narodov za hrano in kmetijstvo. Rim, Italija, 95 str.
9. Orcein. (2018, 30. novembra). Wikipedia, brezplačna enciklopedija. Datum posvetovanja: 03:38, 31. julij 2019.Wikipedija.org.
10. Merck Millipore. (2018, 16. julij). Mikroskopija orcein za certistain mikroskopijo. Na voljo na: Merckmillipore.com