biologija

Kaj je lentivirus?

Kaj je lentivirus?

The Lentivirus, iz latinščine Lenti kar pomeni počasno, to so virus, ki zahteva dolgo, med meseci in leti, od začetne okužbe do pojava bolezni. Ti virusi pripadajo žanru Lentivirus in retrovirus (družina Retroviridae), ki imajo genom RNA, ki se prepisuje na DNK skozi reverzno transkriptazo (TR).

V naravi je lentivirus prisoten pri primatih, ukolacijah in mačjih. Na primer, pri primatih obstajata dva filogenetsko povezana linija: virusi imunske pomanjkljivosti apesficience (SIV) in virusi imunske pomanjkljivosti ljudi (HIV). Oba sta povzročitelja, ki povzročajo sindrom pridobljene imunske pomanjkljivosti (AIDS).

Vir: doktorat DRE pri angleški Wikipediji [CC by-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licence/by-sa/3.0)]

Lentivektor, pridobljen iz lentivirusa, se široko uporablja za osnovne raziskave biologije, funkcionalne genomike in genov terapije.

[TOC]

Stopnje življenjskega cikla retrovirusa

Življenjski cikel vsega retrovirusa se začne z združenjem organizma do specifičnega receptorja na površini celice, čemur sledi internalizacija virusa z endocitozo.

Cikel se nadaljuje z izločanjem virusnega pokrova in tvorbo kompleksa virusnega nukleoproteina (VNC), ki je sestavljen iz virusnega genoma, povezanega z virusnimi in celičnimi proteini. Sestava kompleksa se sčasoma spreminja in je povezana s pretvorbo skozi TR, v genomu Invader v dvojnem propelerju DNA.

Vključitev genoma virusa v celico bo odvisna od zmožnosti virusa genoma, da prodre v gostiteljsko jedro. Reorganizacija VNC ima pomemben uvoz uvoza v jedro, čeprav pomembne celične beljakovine, kot so transportin-SR2/TNPO3, Import-Alpha3 in ImportIn7, vplivajo tudi na jedro.

Vam lahko služi: značilnosti živih bitij

V integraciji virusnega genoma so ključni virusni proteini, kot so integrirani in transkripcijski faktorji gostiteljske celice, kot je LEDCF.

To uporablja stroje gostiteljske celice za prepisovanje in prevajanje virusnih beljakovin in sestavljanje virionov, ki jih osvobodi v zunajceličnem prostoru.

Od lentivirusa do lentivectorja

Retrovirusni genom ima tri odprte odčitke (MLA) za različne virusne elemente. Na primer Capsidia in Matrix (gen gag), encimi (gen Pol) in zavijte (gen Pošlji).

Konstrukcija virusnega vektorja je sestavljena iz izločanja nekaterih divjih virusnih genov, kot so tistih, povezanih z virulenco. Na ta način lahko virusni vektor okuži evkariontske celice, retro-transcribom, integrira v genom gostiteljske evkariotske celice in izraža transgen (vstavljen terapevtski gen), ne da bi povzročil bolezen.

Metoda konstrukcije lentivektorja je prehodna transfekcija. Temelji na uporabi virusnih minigenomov (imenovanih konstrukti), ki prenašajo samo gene, ki vas zanimajo. Prehodna transfekcija je sestavljena iz neodvisne konstrukcije konstrukcij.

Nekateri retroceptorji imajo le glavne elemente za sestavljanje virusnih delcev, imenovane nefunkcionalne retrovectorje. Uporabljajo se za prenos embalažnih celic.

Vektorji s kaseto za ekspresijo transgena lahko okužijo, transformirajo celice (transdukcija) in izražajo transgen.

Namen uporabe ločenih konstrukcij je preprečiti rekombinacijske dogodke, ki bi lahko obnovili divji fenotip.

Tehnologija lentivektorja

Tehnologija Lentivektor ima široko uporabo osnovnih biologije in translacijskih študij za prekomerno ekspresijo Transgenes Stabilno.

Vam lahko služi: kaj je ortogeneza?

Lentivectorji so enostavni za manipulacijo in proizvodnjo sistemov. So integrirani nepovratni in zagotovo gostiteljski genom. Okužijo celice, ki so ali ne v delitvi.

Pokažejo tropizem do določenih tkanin, kar olajša terapijo. Ne izražajo virusnih beljakovin, zato imajo nizko imunogenost. Lahko pošljejo zapletene genetske elemente.

V osnovnih raziskavah so bili lentivectorji, ki temeljijo na virusu HIV, uporabljeni kot interferenčni sistemi za pošiljanje RNA (RNAI) za odpravo funkcije določenega gena in tako omogočajo preučevanje interakcije z različnimi drugimi.

Lentivector, pridobljen iz HIV

V začetku 90. let so bili iz HVI-1 zgrajeni prvi lentivectorji, ki je tesno povezan s SIV Chimpanzee. HVI-1 je odgovoren za AIDS po vsem svetu.

Prva generacija lentivektorja ima pomemben del genoma HIV. Vključuje gene Gal in Pol, in več dodatnih virusnih beljakovin. Ta generacija je bila ustvarjena z uporabo dveh konstrukcij. Eden od njih, ki izraža ladjo, dobavi funkcije embalaže. Druga izraža vse MLA, z izjemo pošiljanja.

Prenosni vektor je sestavljen iz ekspresijske kasete, ki jo zaznamujeta dve vrsti dolgih ponovitev (LTR) in genov, potrebnih za embalažo in povratno transkripcijo.

Druga generacija embalažnih vektorjev nima večine dodatnih genov in obdrži TAT in Rev. Ti geni so bili odstranjeni v tretji generaciji in jih zagotavlja četrti konstrukt.

Prenosni vektorji tretje generacije so sestavljeni iz dveh konstrukcij pakiranja. Eno kodira Gal in Pol. Še en incod Rev. Tretji konstrukt kodira ovojnico, ki izhaja iz VSV-G. Tisti, ki kodira interesni gen, vsebuje inaktivirane zaporedje LTT LTT, da se izognemo rekombinaciji.

Vam lahko služi: kaj je binomna nomenklatura?

V zadnjem primeru regulativni elementi transkripcije povečajo uspešnost transfernih genov.

Lentivector, pridobljen iz drugih virusov

Virus HIV-2 je tesno povezan z Magabey Gris SIV (SIVYe) in je odgovoren za AIDS v zahodni Afriki. Iz tega virusa so bili pridobljeni vektorji prve in druge generacije.

Podobno kot HVI-1, iz SIVYe, EIAV (virus nalezljive anemije) IVF (virus mačje imunske pomanjkljivosti) in BIV (goveji virus imunske pomanjkljivosti (BIV) so bili zgrajeni vektorji treh generacij. Za klinično uporabo so bili razviti vektorji na osnovi EIAV.

Iz virusa virusa artritisa-idefalitisa Caprin (CAEV) so bili zgrajeni vektorji prve in tretje generacije. Medtem ko so bili iz IVR afriške zelene opice, so bili zgrajeni vektorji prve generacije.

Reference

  1. Da Silva, f. H., Dalberto, t. Str., Beyer Nardi, n. 2006. Onkraj okužbe retrovirusa: HIV ustreza genski terapiji, genetiki in molekularni biologiji, 29, 367-379.
  2. Durand, s., Cimarelli, a. 2011. Notranjost iz lentivirusnega vektorja. Virusi, 3: 132-159.
  3. Márai, J., Chuah, m. K. L., Van den Drissche, t. 2010. Nedavni napredek v razvoju in aplikacijah lentivirusnih vektorjev. Molekularna terapija, 18: 477-490.
  4. Milone, m.C., O'Doherty, u. 2018. Klinična uporaba lentivirusnega vektorja. Levkemija, 32, 1529-1541.
  5. Sakuma, t., Barry, m.Do., Ikeda in. 2012. Lentivirusni vektorji: osnovni za translacijo. Biochemical Journal, 443, 603–618.