Vogel-Johnson agar What je, fundacija, priprava, uporablja

On Vogel-Johnson agar Je trdno, selektivno in diferencialno kulturno sredstvo, posebej oblikovano za izolacijo zlati stafilokok. Ta medij sta ustvarila Vogel in Johnson leta 1960 iz modifikacije agarja Telurito Glycina, ki so ga leta 1955 oblikovali Zebovitz, Evans in Niven.

Sprememba je bila vključena iz povečanja koncentracije manitola, ki je prisotna v okolju, in v vključitvi indikatorja pH. Trenutna formula je sestavljena iz tripteína, ekstrakta kvasa, manitola, dipotasijevega fosfata, litijevega klorida, glicina, fenola rdeče, agar, 1% kalijevega telurita.

Treba je opozoriti, da obstajajo drugi mediji, ki so, tako kot Vogel-Johnson Agar, selektivni za izolacijo S. aureus, kot sta Salty Mannitol Agar in Baird Parker Agar. V tem smislu bi lahko rekli, da je temelj Vogela - Johnson se strinja, da je mešanica med slanim manitolskim agarjem in agarjem Baird Parker.

V prvem kolonije S. aureus Odlikuje jih ferment. Na drugi strani pa v drugi S. aureus Zanj je značilno zmanjšanje teluro na teluro in oblikovanje sivih kolonij na črno. Obe lastnosti opazimo v agarju Vogel-Johnson.

Ta medij, tako kot njegovi kolegi, je koristen za odkrivanje zlati stafilokok V vzorcih hrane, zdravstveni nadzor industrijskih izdelkov in v kliničnih vzorcih.

Osnova

Prispevek hranil

Vogel - Johnson medij vsebuje ekstrakt tripteina in kvasa; Obe snovi zagotavljata dolge verižne aminokisline, ki služijo kot viri ogljika in dušika, potrebni za rast bakterij. Bakterije, ki lahko rastejo v tem mediju, bodo prevzele hranila teh snovi.

Selektivna moč

Vogel - Johnson Agar lahko zavira rast gram negativnih bakterij in celo nekaj pozitivnih gramov, kar daje prednost razvoju pozitivnih koagulaznih stafilokokov. Inhibitorne snovi so kalijev tellurit, litijev klorid in glicin.

Diferencialna moč

Snovi, ki naredijo ta diferenčni medij, so manitol in kalijev telurit. Manitol je ogljikovi hidrat in ko nastanejo fermentirane kisline, ki naredijo medij od rdeče do rumene, kar se zgodi zahvaljujoč prisotnosti indikatorja rdečega pH pH.

Medtem ko je brezbarven telurit, ko se zmanjša na kovinsko brezplačno teluro.

On zlati stafilokok Ferments manitol in zmanjšuje teluro na teluro. Zato tipične kolonije S. aureus V tem mediju so sivi ali črni obkroženi z rumenim medijem.

Bakterije, ki rastejo v tem mediju in ne zmanjšujejo telurita ali fermentiranja manitola, bodo zaradi alkalizacije medija z uporabo peptonov tvorijo prozorne kolonije, obkrožene z rdečim medijem, še bolj intenzivnejšim od prvotne barve.

Po drugi strani pa bodo manitol bakterije, ki zmanjšujejo telurit, vendar ne fermente.

Če je medij pripravljen brez dodajanja kalijevega telurita, kolonije S. aureus Razvili bi se kot rumene kolonije, obkrožene z rumenim medijem, kot se dogaja v slanem manitolskem agarju.

Osmotsko ravnovesje in sredstva za strjevanje

Dipotassium fosfat vzdržuje osmotsko ravnovesje medija in pH prilagodi nevtralnosti 7.2. Medtem ko agar daje trdno skladnost kulturnemu mediju.

Priprava

1% P/V raztopina kalijevega telurita

Ta rešitev ni vključena v dehidrirano okolje, ker je ni mogoče sterilizirati v avtoklavu. Zaradi tega je pripravljen narazen in dodan v medij že steriliziran.

Nekatere poslovne hiše prodajajo 1% raztopino kalijevega telurita, pripravljene za uporabo. Če se želite pripraviti v laboratoriju, nadaljujte na naslednji način:

Tehta 1.0 Gr kalijevega telurita in izmeri 100 ml destilirane vode. Raztopite kalijev telurit v delu vode in nato dopolnite količino vode, dokler ne doseže 100 ml. Raztopino sterilizirajte po metodi filtracije.

Vogel-Johnson agar baza

Tehtamo 60 gr dehidriranega medija in se raztopimo v 1 liter destilirane vode. Zmes segrevamo do vrenja, da pomagamo v celotni raztopini. Med postopkom raztapljanja se medij pogosto vznemirja.

Sterilizirajte v avtoklaviranju 15 kilogramov tlaka in 121 ° C 15 minut. Odstranite iz avtoklava in pustite stati, dokler medij ne doseže približne temperature od 45 do 50 ° C. Dodajte 20 ml raztopine kalijevega telurita, ki je bila prej pripravljena na 1%.

Zmešajte in nalijte na sterilne plošče Petri. Naj se strdi in naroči v obrnjeni plošči.

Končni pH pripravljenega medija mora biti na 7,2 ± 0,2.

Pred sejanjem vzorca morate počakati, da plošča prevzame temperaturo okolja.

Barva pripravljenega medija je rdeča.

Uporaba

Čeprav se lahko uporablja za izolacijo S. aureus Pri vseh vrstah vzorcev se večinoma uporablja za mikrobiološko analizo farmacevtskih izdelkov, kozmetike in hrane.

Priporočljivo je, da je inokulum gost. Setev je mogoče izvesti tako, da se s platinasto ročajem ali površino z Drigalski lopatico.

Plošče inkubiramo pri 35-37 ° C 24 do 48 ur v aerobiozi.

QA

Za izvajanje nadzora kakovosti v okolju Vogel-Johnson lahko uporabite naslednje nadzorne kontrole:

zlati stafilokok ATCC 25923, zlati stafilokok ATCC 6538, Staphylococcus epidermidis ATCC 12228, Escherichia coli ATCC 25922 o Proteus mirabilis ATCC 43071.

Pričakovani rezultat je naslednji: za seve S. aureus zadovoljiva rast s črnimi kolonijami, obdana z rumenim medijem. Za S. epidermidis Redna rast s prosojnimi ali črnimi kolonijami, obdana z rdečim medijem.

Tudi, do In. coli Pričakuje se, da bo prišlo do popolne inhibicije in za Proteus mirabilis delna ali popolna inhibicija; Če raste, bo to naredil komaj in kolonije bodo črno obkrožene z rdečo polovično barvo.

Reference

1. BD laboratoriji. VJ (Vogel in Johnson Agar). Na voljo na: BD.com
2. Britanski laboratoriji. Vogel-Johnson agar. Na voljo na: Britanaalab.com