Agencija za sulfit bizmut, priprava in uporaba

On Bizmut sulfitni agar Je trdno, selektivno in diferencialno kulturno sredstvo, posebej oblikovano za izolacijo Salmonella enterica Subgrupo Enterica Typhi SereTypo, Med drugimi vrstami salmonele. Okolje je znano kot BSA se strinja v angleškem agarju sulfita bizmut.

Originalno formulo agarja bizmuta sulfita sta leta 1927 ustvarila Wilson in Blair (železov medij glukoze bizmuta sulfita); To je vsebovalo natrijev sulfit, glukozo, bizmutsko raztopino, amonijev citrat, železov sulfat in agar-adding.

48 -Urska rast inkubacije Salmonella SP v agarju bizmut sulfit. Vir: Pixnio.com avtor: dr. W. R. Erving, USCDCP

Dandanes obstaja sprememba prvotnega medija, sestavljenega iz ekstrakta mesa, peptonov mesa in kazeina, indikatorja sulfita bizmuta, glukoze, disodijevega fosfata, železovega sulfata, svetlo zelene in agar-agar.

Obstaja veliko sredstev za izolacijo vrst salmonele, toda ko gre za obnovo serotipa Typhi, bizmut sulfitni agar predstavlja izjemno prednost pred njimi, saj v večini dobimo zelo nizko ali ničelno okrevanje tega mikroorganizma.

Vendar je treba uporabiti več vrst medija, ko gre za izoliranje enteropatogenega, ker je bizmut sulfitni agar manj učinkovit za druge vrste salmonele in za rod Shigella, ki se v tem agarju zavirajo ali se zelo slabo razvijejo ali zelo slabo razvijejo.

Treba je opozoriti, da je od vseh vrst salmonele serotip Typhi eden najpomembnejših enteropatogenov pri človeku, kar je edino rezervoar. Ta serovarity proizvaja tifusno vročino, gastroenteritis, bakteriemo in septikemijo.

Zaradi tega je pomembno vključiti ta agar, ko se analizirajo vzorci vode, blata ali hrane, kjer je sum na vašo prisotnost.

[TOC]

Osnova

Kot večina gojenih medijev bizmut sulfitni agar vsebuje prehranske snovi za spodbujanje bakterijskega razvoja, kot so peptoni in ekstrakt mesa. Prav tako glukoza deluje kot vir energije in ogljika.

Vam lahko služi: biogenetski elementi

Zdaj ne bodo vse bakterije rasle v tem mediju, saj je bizmut sulfitni agar selektivni medij. Ta vsebuje spojine, ki zavirajo rast gram pozitivnih mikroorganizmov in določenih gram negativnih bakterij. Te spojine so: indikator sulfita bizmuta in svetlo zelena.

Po drugi strani disodijev fosfat ohranja osmolarnost in pH medija.

Poleg tega je bizmut sulfitni agar diferenčni medij zahvaljujoč prisotnosti železovega sulfata, ki prikazuje nastanek H₂S.  H₂S, ki ga tvorijo bakterije, reagira s železovim sulfatom in tvori jasno vidno netopno oborino.

Končno Agar -agar zagotavlja trdno doslednost okolju.

Priprava

Tehtamo 52,3 gr dehidriranega medija in se raztopimo v litru vode. Segrejte, da mešanico zavremo 1 minuto s pogostim vznemirjenjem, do njegovega skupnega raztapljanja. Ne pregrejte se preveč. Ta medij ni steriliziran v avtoklavu, ker ekstremna toplota poškoduje kulturni medij.

Pustite, da se ohladi pri 45 ° C in se strese, preden servirate na sterilnih ploščah Petri. Priporočljivo je izdelati plošče z dobro debelino. Za to je treba v vsako ploščo vliti 25 ml. Naj se strdi. Kot je sredstvo, ki ni sterilizirano, je normalno, da se predlaga njegova neposredna uporaba.

Vendar je študija D'Austa leta 1977 pokazala, da je boljše okrevanje Salmonella tiphimurium in Salmonella Enteritidis Kot srednja starost bizmuta sulfita na uspešnost serovarij ne vpliva Typhi in Paratiphi b.

D'Aus priporoča uporabo plošč do 4. dneva hlajenja, čeprav opozarja, da se s srednjo starostjo selektivnost zmanjšuje in se lažje razvije Proteus vulgaris.

Zato je za zelo onesnažene vzorce, kot so blato, bolje uporabiti novo pripravljeni medij. V nasprotnem primeru uporabite do 4. dneva njegove priprave. Drugi avtorji priporočajo uporabo plošč dan po pripravi, shranjeni v hladilniku.

Vam lahko služi: Uracil: struktura, funkcije, lastnosti, sinteza

Hladilne plošče morajo biti pred uporabo. Srednji pH mora biti 7,5 ± 0,2. Barva neplačanega medija je bež in pripravljena je opalescentna zelenkasto siva.

Prijave

Med vzorci, ki jih je mogoče posejati v tem mediju, so vzorci blata, potrošniške vode ali hrana in hrana.

Če želite izboljšati izolate.

Plošče inkubiramo pri 35 ° C ± 0,2 24 do 48 ur v aerobiozi.

Značilnosti kolonij v agarju Bizmut sulfit

Kolonije Salmonella Typhi Običajno jih vidimo v tem agarju v 24 urah s črnim središčem in obkrožen s svetlo zelenim halo. Medtem ko se v 48 urah črna popolnoma zasuka zaradi tvorbe vodikovega sulfida.

Salmonella Paratiphi a Predstavlja kolonije s spremenljivimi značilnostmi. Po 18 urah inkubacije lahko opazimo črne, zelene ali prozorne kolonije z videzom mukoida. Medtem ko jih pri 48 urah opazujejo popolnoma črne in včasih z izrazito kovinsko svetlostjo.

S. Paratiphi a Nagiba se, da se medij okoli kolonije.

Salmonella sp Črni ali sivkolonias, z ali brez kovinskih svetlih, lahko postanejo površina ali ne.

Koliformni sevi so običajno popolnoma zavirani, če pa rastejo, se razvijejo kot neprozorne zelene ali rjave kolonije in kovinske svetlosti. Ne obarvajte medija okoli kolonije.

Omejitev

-Zelo šibki inokulumi lahko povzročijo kolonije Salmonella Typhi svetlo zelena, ostala neopažena in poročanje kulture kot negativno.

Vam lahko služi: veje fiziologije

- Bizmut sulfitni agar lahko zavira okrevanje nekaterih vrst salmonele, kot je S. Sendai, s. Berta, s. Gallinarum, s. abortus-equi.

-Ta medij zavira večino vrst rodu Shigella.

- S. Typhi in s. Arizonae Lahko dajo zelo podobne kolonije.

-Koliforme, ki jih proizvaja H₂S, kot sta Proteus in Citrobacter, proizvajajo kolonije, podobne tistim iz salmonele, zato je treba opraviti biokemične identifikacijske teste.

-Za pridobitev izoliranih kolonij je treba narediti dobre estrije; To je edini način za opazovanje značilnih značilnosti kolonij rodu Salmonela.

QA

Za nadzor sterilnosti se plaka inkubira brez inokuliranja pri 37 ° C.

Za nadzor kakovosti lahko posejate znane seve, kot so:

Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella Typhi ATCC 19430, Shigella Flexneri ATCC 12022, Enterococcus faecalis ATCC 29212.

Pričakuje se, da Escherichia coli in Shigella Flexneri delno zavirajo razvijanje zelenkasto in rjavo rjave kolonije. Medtem ko morata oba salmonglarji odličen razvoj s črnimi kolonijami s kovinsko svetlostjo in na koncu Enterococcus faecalis mora biti popolnoma zaviran.

Reference

1. Wilson, w., & E. M. MCV. Blair. Uporaba glukoznega bizmut sulfitnega železnega medija za izolacijo B. Tifosus in B. Proteus. Časopis za higieno, 1927; 26(4), 374–391. Pridobljeno iz .Jstor.org
2. D'Ast Jy. Vpliv pogojev skladiščenja zmogljivosti agarja bizmut sulfita. J Clin Microbiol. 1977; 5 (2): 122-124. Na voljo v: NCBI.NLM.ameriški nacionalni inštitut za zdravje.Gov
3. IVD laboratoriji. Bizmut-sulfitni agar po Wilson-Blairju. 2009. Dostopno na: bismuthsulfitagar_span_jan_2009%20 (2).PDF
4. Himedia Laboratories. Bizmut sulfitni agar. 2017. Na voljo na: Himediabs.com
5. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 ed. Pan -ameriški uredništvo s.Do. Argentina.
6.  Morales R, iz La Cruz D, Leyva G in Ybarra M. Bakteriološka kakovost surovega kozjega mleka, proizvedenega v Miravallesu, Puebla. Rev Mex of Ing Chem 2012; 11 (1): 45–54