Koruzna moka. Temelj, priprava in uporaba

On Koruzni agar moke Je trdna gojilna medij, nizka prehranska moč, uporabna za subkulturno Candida albicans. V angleščini je znan kot koruzni obrok agar.

Srednja običajna koruzna moka ima zelo preprosto sestavo, vsebuje koruzno moko, agar in vodo. Zaradi nizke prehranske ravni je idealno, da ga uporabljamo pri vzdrževanju glivičnih sevov za zmerno časovno obdobje, zlasti črne glive.

Do. Grafični prikaz kompleksa Candida albicans v agarju koruzne moke. B. Clamidosporas kompleksnega pogleda Candida albicans do mikroskopa, oblikovanega v koruzni moki. Vir: a. Grahamcolm [cc by-sa 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licence/by-sa/3.0)]/ b. Avtor: CDC/DR. William Kaplan, vljudnost: Knjižnica slik za javno zdravje.

Kompleksna sporulacija Candida albicans V tem mediju je naklonjen, če se med pripravo agarja doda 1% Tween 80. Za to vrsto je značilna tvorba Clamidospores in praktično edina, ki prizadene človeka.

Obstajajo druge vrste, ki tvorijo Clamidospore, vendar je malo verjetno, da vplivajo na človeka, na primer Candida Australis, prisoten v iztrebkih pingvinov, ali C. Clausenii, kar je saprofit, ki ga redko najdemo. Tudi izjemno vrste C. Stellatoid in C. Tropicalis Lahko bi jih oblikovali.

Po drugi strani dodajanje glukoze srednji koruzni moki daje prednost tvorbi pigmentov v sevih Trichophytom rubrum.

Pomembno je poudariti, da obstajajo glive, ki v koruzni moki za napade ne tvorijo hiphaiv, niti psevdohife, kot je na primer Cryptococcus neoformans, razlikovanje od drugih žanrov.

Agar koruzne moke se lahko pripravi v laboratorijih ali komercialnih medijih.

[TOC]

Osnova

Koruzna moka je substrat, agar je strjevalno sredstvo in voda je topilo.

Agar koruzne moke lahko dopolnimo s Tween 80 (poliester 80 sorbita monolata ali polisorbat). Ta spojina zmanjšuje površinsko napetost okolja s svojo močjo emulgiranja.

Vam lahko služi: fosfatidilinozitol: struktura, usposabljanje, funkcije

Prav tako ustvarja sovražno atmosfero, ki zavira pretirano množenje celic in spodbuja rast hip, ki daje prednost tudi proizvodnji clamidospore; Slednji so upoštevali strukture odpornosti. Ta struktura pomaga pri identifikaciji vrste Candida albicans.

Glukoza v tem mediju poveča zmogljivost pigmenta nekaterih gliv.

Treba je opozoriti, da srednja koruzna moka z glukozo ne služi demonstraciji Clamidospore v COmplejo Candida albicans.

Priprava

Domača apar koruzne moke

Tehtamo 47 gr rumene koruzne moke in se raztopi v 500 ml destilirane vode. Toplota na 60 ° C, medtem ko je priprava vznemirjena v približno 1 uri. Nato filtrirajte skozi kos gaze in bombaža, po želji ga lahko spet filtrirate prek filtrirnega papirja Whatman št.

Obveščete prostornino pri 1000 ml z destilirano vodo. Dodajte 17 gr agar-voda, toploto, da se raztopi. Autoclavar 15 minut pri 121 ° C.

Postrezite v petrijskih sterilnih ploščah. Prihranite v hladilniku.

Barva pripravljenega medija je belkasta z grudastim videzom.

Če želite pripraviti koruzno moko z glukozo, v zgoraj opisano pripravo, da dodate 10 gr glukoze.

Komercialni agar koruzne moke

Tehtamo 17 gr dehidriranega medija in se raztopimo v 1 liter destilirane vode. Zmes se lahko segreje in nežno meša, da se popolnoma raztopi. Sterilizirajte v avtoklavu pri 121 ° C, 15 lb, 15 minut.

Nalijte v sterilne plošče Petri. Naj se strdi. Investirajte in prihranite v hladilnik do uporabe. Pred uporabo.

PH mora biti 6,0 ± 0,2 do 25 ° C.

Agar koruzne moke s Tween 80

Če želite upoštevati standard ISO 18416, mora biti agar koruzne moke pripraviti na naslednji način:

Vam lahko služi: acetil koencim do

Tehtamo 65 gr na liter in dodajte 10 ml Tween 80. Segrejte in kuhajte nekaj minut, dokler se ne raztopite, pri tem pazite, da ne pregrejete. Sterilizirajte pri 121 ° C 15 minut.

Koruzni agar z glukozo

Izboljšati kromogeno moč kolonij Trichophyton rubrum in jih razlikovati od T. Mentagrophytes, 0,2% glukoze v prvotno formulo lahko dodate. Ni treba imeti med 80.

Uporaba

V glavnem je uporaba agarja koruzne moke namenjena preučevanju sevov Candide, ki pomaga njeni identifikaciji z značilnim opazovanjem kloidospore pri vrstah Albicans. To pomeni, da uporaba tega agarja služi kot pomožna metoda prepoznavanja teh kvasovk.

V tem agarju lahko razvije tako saprofitne kot patogene vrste, vendar vsaka oblika značilne micelijske strukture. Na primer, vrste rodu Torulopsis ne proizvajajo micelijev in se razmnožujejo samo z Blastoconidia.

Prav tako vrste Trichhosporon in Geotrichum proizvajajo artrokonidijo v koruzni moki, včasih pa je težko razlikovati med enim in drugo.

Genotrichova artrokonidija proizvaja podaljšek hif, ki spominjajo na hokejsko palico.

Pri identifikaciji je uporaben tudi proizvodnja pigmenta z uporabo glukoze, ki je dopolnjena z glukozo Trichophytom rubrum.

Posejan

V moki agar moke sumljive kolonije odkrito. Medij se posejemo in inkubiramo pri 22 ° C 24 do 48 ur. Čas inkubacije se lahko po potrebi podaljša.

Demonstracija clamidospore

V ta namen je treba agar koruzne moke s Tween 80 inokulirati s tehniko Dalmau. Ta metoda je sestavljena iz tega, da je s platino ročalo del sumljive kolonije in naredila tri vzporedne reze v sredini, pri čemer drži ročaj pri 45 °. Rezi morajo biti ločeni na razdalji 1 cm med enim in drugim.

Vam lahko služi: flora in favna iz Afrike: reprezentativne vrste

Nato je postavljen predhodno vgrajen predmet nad posejanimi raztežnimi znamkami, tako da je pokrita polovica in druga odkrita.

Inkubirajte plošče, posajene pri 30 ° C 48-72 h in nato pregledate mikroskop skozi prevleke.

Vzdrževanje glivičnih sevov

Za vzdrževanje sevov so zasajene plošče in poplave shranjene v hladilniku (4 do 8 ° C). Na ta način lahko trajajo nekaj tednov in jih uporabijo za poučevanje ali raziskovalne namene.

QA

Za nadzor sterilnosti se inkubira plošča brez inokuliranja pri sobni temperaturi, pričakujemo, da ne pride do rasti ali sprememb barve.

Za nadzor kakovosti lahko posejate znane seve, kot so: zlati stafilokok, ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Aspergillus niger ATCC 16404, Candida albicans ATCC 1023, Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763.

Pričakovani rezultati so delna inhibicija za S. aureus in In. coli. Medtem ko se v preostalih sevih pričakuje zadovoljiva rast.

Aspergillus niger Raste s črnimi kolonijami in sporalirano v približno 5 dneh inkubacije.

Candida albicans Kolonije leveaduriform s proizvodnjo Clamidospores.

Saccharomyces cerevisiae proizvajajo velike celice kvasovk.

Omejitve

Na dnu plošče se tvori rumena oborina, ki je ne bi smeli zamenjati s kolonijami.

Reference

1. Neogen laboratoriji. Agar za koruzni obrok. Na voljo na: FoodSafety.Neogen.com.
2. Mediji za gojenje mikrokitov. Agar za koruzni obrok. Na voljo v: medijska kultura.com.
3. Linares m, solís f. Vodilna identifikacija kvasovk. Dostopno na: http: // www.vodnik.Oživil bom.
4. Urcia F, Guevara m. Rev. Peru Med.Exp. Javno zdravje, 2002; 19 (4): 206–208. Na voljo na: Scielo.com
5. Hišna hiša g. Splošna mikologija. 1994.  2. izd. Centralna univerza v Venezueli, knjižnična izdaja. Venezuela Caracas.
6. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 ed. Pan -ameriški uredništvo s.Do. Argentina.
7. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Mikrobiološka diagnoza. 5. izd. Pan -ameriški uredništvo s.Do. Argentina.
8. Grad e. Primerjalna študija nekaterih makro in mikroskopskih metod za izolacijo in prepoznavanje rodu Candida. Rev. Kolumbijske farmacevtske kemijske znanosti. 1970; 3 (1): 33–57. Na voljo v: znanosti.a i.Edu.co