Salmonella-shigella agar

On Salmonella-shigella agar Znan tudi kot SS Agar, je zmerno selektiven in diferencialni medij, posebej zasnovan za izolacijo enteropatogenih bakterij salmonele in shigella, tako iz okoljskih kot kliničnih vzorcev.

Agar SS ima zapleteno sestavo; Sestavljen je iz ekstrakta mesa, peptona, laktoze, žolčnih soli, natrijevega citrata, natrijevega tiosulfata, železovega citrata, agarja, nevtralno rdeče, svetlo zelene in destilirane vode. Glede na svojo veliko selektivnost je mogoče vzorce posejati z obilno mešano floro.

SS agar s kolonijami Salmonella SP. Vir: Manurx27 [CC BY-SA 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licence/by-sa/4.0)], iz Wikimedia Commons

V mikrobioloških laboratorijih se salmonella-shigella medij pogosto uporablja za raziskovanje prisotnosti salmonele in shigella v vzorcih driske, odpadne vode, pitne vode in hrane.

Včasih je treba uporabiti juhe pred Enrique (juha Lactosado) in obogatitev (juha Selenito Cistina) za obnovo sevov salmonele.

Ti koraki so potrebni, kadar obstaja obstoj salmonele v zelo nizki količini ali kadar se sev lahko maltretirajo z industrijskimi proizvodnimi postopki, predvsem predelana hrana. Priporočljivo je tudi obogatiti vzorce blata pri bolnikih, ki so bili zdravljeni z antibiotiki.

Nato lahko obogateno juho posejemo v agar Salmonella-shigella in v drugih podobnih medijih, kot so Xilosa Agar, Lysina Desoxicolate (XLD) in Agar Hektoen Enter (He).

Osnova

Vsaka komponenta kulture Salmonella-shigella ima posebno funkcijo, mešanica kot celota.

Prehranska moč

Ekstrakt in pepton mesa (prebavljen z živalskim tkivom) zagotavljata potrebna hranila (dušikovi, ogljik in vitamini) za razvoj mikroorganizmov, ki lahko prenašajo preostale komponente.

Vam lahko služi: ribulosa: značilnosti, struktura in funkcije

Doslednost

Agar -agar je odgovoren za zagotavljanje trdne doslednosti za okolje.

Selektivno

Ta medij je zelo selektiven, ker vsebuje žolčne soli, natrijev citrat in svetlo zeleno. Zato zavira rast vseh gram pozitivnih bakterij in najbolj gram negativnih bacilov, vključno z nekaterimi koliformi.

Medtem ko bakterije rodu Salmonella in nekaj sevov Shigelle, če podpirajo te spojine.

V glavnem je rod salmonele zelo odporen na žolčne soli, toliko, da lahko živijo v žolčniku nekaterih bolnikov z nosilci.

Diferencialno

Laktoza je fermentacija ogljikovih hidratov, ki pomaga razlikovati seve laktoze od ne -fermentacije. To lastnost dokazuje prisotnost indikatorja pH, ki je v tem mediju rdeča fenola.

Laktozni fermentacijski sevi dajejo rdeče kolonije, medtem ko so nefermentacije brezbarvne. Ta lastnost je pomembna, saj salmonela in Shigella ne fermentirata laktozo.

Po drugi strani ta medij vsebuje natrijev tiosulfat kot vir sulfida in železovega citrata kot vira železa. Obe spojini uspeta razlikovati bakterije, ki lahko proizvajajo vodikov sulfid. Ti reagirajo tako, da tvorijo črno oborino netopnega in vidnega železovega sulfida.

Ta lastnost ima nekaj sevov rodu salmonele. Običajno so njene kolonije brezbarvno ravno s črno točko v središču istega. Preostali salmonelali ne proizvajajo h₂S in razvijte kot brezbarvne kolonije.

Po drugi strani so kolonije rodu Shigella brezbarvne brez črnine.

Vam lahko služi: partenogeneza

Priprava

Ta medij je zelo preprost za pripravo.

Tehtamo 63 gr dehidriranega komercialnega medija in se raztopimo v litru destilirane vode. Segrejte raztopino in pretresite.  Zmes lahko nekaj minut doseže vretje.

Ta medij ne sme biti avtoklaviran. Po razpadu se uporablja neposredno na preprostih ali dvojnih sterilnih ploščah.

S strjevanjem so na voljo na obrnjenem načinu v trombocitih in so shranjeni v hladilniku (2-8 ° C) do uporabe.

Medij po pripravi mora biti pri pH 7,2 ± 0.2 in z oranžno rdečo.

Pomembno je, da se plošče ublažijo, preden sejajo vzorce. Izvirni vzorec je mogoče sejati neposredno, nalaganje gradiva v del agarja in nato od tam, da se bori z izčrpanostjo.

V primeru nošenja obogatenih juhov, prehodi del juhe Selenito in setev z lopatico Drigalski.

37 ° C se 24 ur inkubira v aerobiozi.

Upoštevajte, da se količina gramov kljub in končni pH medija lahko razlikuje od komercialne hiše do druge. Srednje zlo vedno prinaša indikacije za njegovo pripravo.

Uporaba

Pogosto se uporablja pri analizi Comborountures in v mikrobiološki študiji vzorcev odpadne vode, potrošniških voda in hrane.

Pogosto so pripravljene dvojne plošče, na eni strani je nameščen agar salmonella-shigella, na drugi agar XLD.

Omejitve

-Nekateri sevi Shigella ne rastejo v tem mediju. Zato ni priporočljivo za primarno izolacijo tega žanra.

-Ni vsaka prozorna kolonija s črnim centrom kaže na salmonelo; Za pravilno identifikacijo je treba opraviti biokemijske teste, saj kolonije nekaterih beljakovinskih sevov ne razlikujejo od kolobonikov salmonele.

Vam lahko služi: populacija živali ali biološko

-Dehidrirani medij mora poskrbeti za izpostavljenost okolju, saj je zelo higroskopski. Zato ga je treba hraniti v suhem in dobro zaprtem okolju. Odprto za zelo kratka obdobja.

-Sčasoma se lahko oborine žolčne soli medija in tvorijo sliko, podobno zapleteni znotraj agarja, vendar to ne vpliva na rezultate.

-Nekateri sevi Shigella lahko počasi fermentirajo laktozo.

QA

Če želite dokazati, da medij deluje pravilno, je priporočljivo.

Za to lahko uporabite seve In. Coli, Enterobacter SP, Klebsiella pneumoniae, Shigella Flexneri, Salmonella Typhimurium tudi Enterococcus faecalis.

Pričakovani rezultati so:

Escherichia coli --Roza konveksne kolonije.

Enterobacter in Klebsiella- Velike kolonije in rdeče ali roza mukoide.

Shigella Flexneri --Ravne ali brezbarvne ravne kolonije.

Salmonella tiphimurium - Brezbarvne kolonije s črnim centrom.

Enterococcus faecalis-- Skupna inhibicija.

Reference

1. Diffco Laboratories Francisco Soria Melguizo. Salmonella-shigella agar. Na voljo na: F-SORIA.je
2. BD laboratorij. Bd salmonella-shigella agar. Na voljo na: BD.com