Drži, kaj je, temelj, priprava, uporablja

On Endo agar ali srednje endo je trdna, diferencialna kultura in z določeno stopnjo selektivnosti. Prvotna formula je ustvarila Endo leta 1904, da bi razlikovala fermentarna bakterije ne -fermentacijske laktoze. Začetno Salmonella Typhi, Toda kasneje se je cilj medija usmeril v iskanje koliform.

Začetek Endo Agarja je ostal, vendar je njegova formulacija z leti doživela nešteto sprememb. Trenutno je medij sestavljen iz živalskega tkivnega peptika, laktoze, vodika, natrijevega sulfita, osnovnega fuchsina in agarja in agarja.

Glavna uporaba medija je bila povezana z izolacijo in razlikovanjem gram negativnih bacilov, ki pripadajo družini Enterobacteriaceae in drugih bližnjih družin.

Dolgo časa so ga uporabljali pri odkrivanju koliform v vzorcih vode, mlečnih izdelkov in hrani. Vendar nekateri mikrobiološki laboratoriji uporabljajo ta agar za izolacijo iz kliničnih vzorcev.

Osnova

Endo Agar vsebuje peptone, ki služijo kot vir aminokislin, dušika, ogljika in energije, potrebne za rast malo zahtevnih mikroorganizmov.

Po drugi strani pa rahlo selektivni značaj agarja zagotavlja agregat natrijevega sulfita in osnovnega fuchsina; Obe komponenti delno ali popolnoma zavirata razvoj večine pozitivnih gram bakterij.

Diferencialni značaj je podan s prisotnostjo fermentalnega ogljikovega hidrata, ki je v tem primeru laktoza in osnovni fuchsin, ki služi tudi kot indikator pH.

Vam lahko služi: taktizem

Gramove negativne bakterije, ki rastejo v tem agarju in so sposobne fermentirane laktoze, bodo tvorilo močne roza kolonije; biti patognomoničen Escherichia coli Oblikovanje temno rdečih kolonij z zelenkastim kovinskim sijajem. To je posledica visoke proizvodnje kisline iz fermentacije ogljikovih hidratov.

Treba je opozoriti, da medij, ki ga najdemo okoli kolonij. Medtem ko gram negativni bacili ne -fermentirajoči laktoza tvorijo bledo roza kolonije, podobne srednji ali brezbarvni.

Dopotassijev fosfat vodika uravnoteži pH medija, agar pa je komponenta, ki zagotavlja trdno konsistenco.

Priprava

Endo agar

Tehtamo 41,5 gr dehidriranega medija in se raztopi v 1 liter destilirane vode. Mešano mešanico pogosto segrejte, dokler ni skupnega raztapljanja srednje. Sterilizirajte v avtoklavu pri 121 ° C, 15 lb tlaka, 15 minut.

Ko odstranite iz avtoklava, pustite, da se ohladi do približno temperature 45-50 ° C. V sterilne plošče nalijte 20 ml.

Preden prihranimo v hladilniku, pustite utrjevanje plošč, investirajte in shranite v plaketo ali zavijte s temnim papirjem. Zelo pomembno je zaščititi pripravljeno okolje pred neposredno svetlobo. Priporočena praksa je priprava natančnega zneska, ki bo potreben.

Če so shranjene v hladilniku, je treba pred uporabo plošče pustiti, da se ublažijo.

Srednji pH mora biti med 7,2 do 7,6, barva pripravljenega medija.

M-Endo agent

Obstaja še ena različica Endo Agarja (M-Endo), ki sledi formuli McCarthy, Delaney in Grasso, ki vsebuje več spojin in se razlikuje v obliki priprave.

Lahko vam služi: Zygote: klasifikacija, usposabljanje, razvoj in segmentacija

Ta varianta vsebuje: laktoza, triptoza, prebavljiv encimski encimski, živalski tkivni encim, natrijev klorid, dibásic kalijev fosfat, natrijev sulfit, ekstrakt kvasa, monobazični kalijev fosfat, osnovni fuhin, postavitev natrija, lauril sulfat Sodium, lauril sulfat Sodium in lauril sulfat Sodium in Lauril sulfat Sodium in Lauril sulfat Sodium in Lauril sulfat Sodium in Lauril Sulate Sodium in Lauril Sulate Sodium in Lauril Sulat SODIUM.

V tem primeru se 51 gr dehidriranega medija tehta in suspendira v 1 liter destilirane vode, ki vsebuje 20 ml etanola.

Med mešanjem rahlo segrejte, da se medij popolnoma raztopi. Ne sme se pregrevati in bodisi sterilizirati v avtoklavi. Ko je zmes homogena, postrezite v petrijskih sterilnih ploščah in pustite, da se strdi.

Uporaba

V nekaterih državah se še vedno uporablja za štetje skupnih in fekalnih koliform v vzorcih vode in hrane, zlasti prisotnosti Escherichia coli Kot glavni kazalnik fekalne kontaminacije.

Ameriško združenje za javno zdravje (APHA) priporoča M-Endo Agar za spremljanje in nadzor programov dezinfekcije in čiščenja odpadne vode ter pri oceni kakovosti pitne vode.

Najbolj uporabljena metoda je membranska filtracija, predhodna obogatitev vzorca z juho lavrilo sulfata 2 do 4 ure.

Uporablja se lahko tudi kot nadomestek za eblak v mikrobiološki analizi hrane in vode z najverjetnejšo tehniko številke (NMP), zlasti v celotni potrditveni fazi za potrditev prisotnosti In. coli iz Murky Ec juhe.

QA

Za oceno kakovosti seje seje kakovosti pripravka, ki se konča, znani ali certificirani kontroli.

Med sevi, ki jih je mogoče uporabiti v ta namen, so: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli ATCC 11775, Kanalizacija Enterobacter ATCC 13047, Klebsiella pneumoniae ATCC 13883, Salmonella tiphimurium ATCC 14028, Shigella Flexneri ATCC 12022, Proteus mirabilis ATCC 14153 in Enterococcus faecalis ATCC 11700.

Lahko vam služi: flora in favna andske regije: reprezentativna vrsta

Seve sejemo s izčrpanostjo in inkubiramo pri 37 ° C 24 ur pri aerobiozi.

Pričakovani rezultati so:

• Za Escherichia coli: Močne rdeče kolonije, s kovinskim sijajem.
• Za In. Cloacae in K. pneumoniae Kolonije morajo biti roza mukoidi.
• V primeru S. Typhimurium, s. Flexneri in p. Mirabilis Kolonije so običajno bledo roza ali brezbarvne.
• Končno, In. Faecalis Pričakuje se, da bo delno zaviran, zato mora biti njegova rast slaba z zelo majhnimi roza kolonijami.

Omejitve

-Endo medij ima pod selektivno močjo, zato lahko zraste nekaj gram pozitivnih mikroorganizmov, kot so Staphylococcus, Enterococcus in celo kvasovke.

-Drugi bacili, ki ne pripadajo družini Enterobacteriaceae, se lahko razvijejo v tem mediju, na primer Pseudomonas sp in Aeromonas sp. Značilnosti teh sevov so brezbarvne nepravilne kolonije.

-Ta pripravljeni medij je zelo občutljiv na svetlobo, zato je dolgotrajna izpostavljenost temu poslabšanju indikatorskega sistema, ki je nepovratno škodoval okolju.

-Srednje komponente veljajo za rakotvorne, zato se je treba izogibati neposrednemu stiku.

-Dehidrirani medij je zelo higroskopski in ga je treba vzdrževati v prvotni posodi pri sobni temperaturi, dobro zaprti in v suhem okolju.

Reference

1. BD laboratoriji. Endo agar. Na voljo na: BD.com
2. Neogen laboratoriji. Sem agar. Na voljo na: FoodSafety.Neogen.com