Ksantoproteična reakcijska fundacija, postopek, uporaba

The Ksantoproteična reakcija Gre za kemični postopek, ki se uporablja za določitev prisotnosti ali odsotnosti aromatičnih aminokislin, kot sta tirozin in triptofan, ki so lahko prosti ali sestavni topni proteini, peptidi ali polipeptidi.

Uporablja se tudi za odkrivanje strupenih snovi na ravni krvi, ki vsebujejo beancenično skupino v njegovi strukturi. Ta test je znan tudi kot Becher ksantoproteična reakcija.

Pozitiven ksantoproteic Reaction Vir: Vzet iz videoposnetka: https: // youtu.Biti/gzgmbw5w4wo

Ksantoproteična reakcija uporablja koncentrirano dušikovo kislino, toploto in nevtralizacijo alkalij. Če se pri nevtralizaciji reakcije raztopina rumene do oranžne raztopine šteje za pozitivno. Opažena obarvanost je posledica tvorbe dušikovih spojin, ki izhajajo iz nitrifikacije benzenskih skupin.

Če morate količinsko določiti količino skupnih beljakovin, je treba uporabiti druge metode določanja beljakovin, kot je Biuret.

Ksantoproteična reakcija se uporablja predvsem pri analiziranju snovi, na katere njegova kemična sestava ni znana. Na splošno je ta reakcija del nabora testov, ki bodo pomagali določiti kemično sestavo določene snovi ali izvleči. Zato ga raziskovalci pogosto uporabljajo.

Po drugi strani se Becherjeva ksantoproteična reakcija uporablja za odkrivanje fenolnih in indoličnih snovi v krvi, ki je mogoče napovedati pojav nefropatije, preden se poveča drugi parametri.

[TOC]

Osnova

Reakcija v osnovi zazna prisotnost benzenske skupine, tako v aminokislinah, kot pri beljakovinah in peptidih. Dušikova kislina deluje na aminokislinski Bencenski obroč, ki ga ima in tvori fenolne nitrokompozicije.

Reakcija je treba izvesti toploto, običajno se nastaja oborina, ki obloži medij, zaradi česar je mlečna. Oborina je lahko bela ali rumena. Končno zahteva korak alkalizacije, ki poudarja barvo. Za to se uporablja baza 40% ali amonijak natrijev hidroksid.

Reakcijo bomo razlagali kot pozitivno, če opazimo močno rumeno obarvanost med temnim ogrevanjem ali oranžnim procesom z alkalizacijo reakcije. Zaznane aminokisline so predvsem tirozin in triptofan.

Ksantoproteična reakcija. Vir: http: // esteroisomeras.Blogspot.com/2013/06/karakterizacija beljakovin.Html

V primeru fenilalanina, čeprav gre za aromatične aminokisline, je benzensko jedro te aminokisline težko nitatizirati v preprosti reakciji, zato bo oddajal ali negativno ali šibko pozitivno reakcijo.

Vam lahko služi: polarnost (kemija): kaj je, definicija, primeri

Na splošno lahko ksantoproteični test dopolnimo s testom Hopkins-Cole, ki služi posebej za identifikacijo triptofana. Če je ksantoproteic test pozitiven in je Hopkins-Cole negativen, se prisotnost triptofana zavrže v tej raztopini, kar vodi do prisotnosti predvsem tirozina. Prav tako ga je mogoče dopolnjevati tudi z Millonovo reakcijo na odkrivanje tirozina, med drugim.

To reakcijo lahko uporabimo tudi na vzorcih krvi, v plazmi ali nespremenjenem serumu za diagnozo uremije ali ledvične insuficience. V tem primeru je iskano odkrivanje strupenih snovi (fenolnih in indoličnih), proizvedenih iz črevesne gnilobe.

Te snovi imajo benzensko skupino in zato dajejo pozitivno ksantoprotejsko reakcijo, čeprav reakcionarna snov ni niti aminokislina niti beljakovine.

Postopek

- Ksantoproteična reakcija za odkrivanje aminokislin z aromatičnimi skupinami

V čisto in suho epruveto postavite 1 ml problematičnega vzorca.

-Dodamo 0,5 ml koncentrirane dušikove kisline.

-Inkubirajte zmes v kopalnici 70 ° C 2 minuti. Prej pripravi kopel Maria pri zgoraj omenjeni temperaturi.

-Ko vzamete cev iz Maria Bath, je mogoče opaziti, da je raztopina postala mlečna in je vzela nekaj rumenkasto bele obarvanosti.

-Raztopino ohladimo tako, da na dnu cevi spustimo hladno vodo.

-Priprava naj bi počasi (padla po padcu) 40 -odstotna raztopina natrijevega hidroksida, dokler ne pride do barvnega udarca.

-Če je test pozitiven, bo v tekočem vmesniku oblikovan temno oranžni obroč.

-Če je reakcija negativna.

- Ksantoproteična reakcija za odkrivanje fenolnih in indoličnih snovi v krvi

-Odpušča 5 ccm trikloroocetne kisline pri 20% nad 5 ccm venske krvi, plazme ali seruma, kar je najbolj označeno. Dobro premešajte in filtrirajte.

Vam lahko služi: dušikova kislina (HNO3)

-2 cc filtriranja se vzamemo in mešamo z 0,5 ccm dušikove kisline. Potem se segreje do vrenja, saj cev za 30 sekund postavimo neposredno na plamen vžigalnika. Ohladi se z vodo in dodajte 1,5 natrijevega klorida pri 33%.

Razlaga se na naslednji način:

-Negativni rezultat: rumenkasta barva.

-Pozitiven rezultat (+) limona rumena.

-(++) Zlato rumeno.

-(+++) temno rumena do rjava

Razlaga ga je mogoče tudi z referenčno kolorimetrično lestvico Auenrieta, ki jo sestavljajo različne koncentracije kalijevega bikromata. To je pripravljeno v redčenju 10 od 10 iz matične raztopine 0,03874%. Vsaka cev predstavlja odstotek.

Razlagalne lestvice

Obstajata dve lestvici interpretacije, imenovani starodavni in moderni. Običajne vrednosti so:

Stara tabela: med 75 in 85%

Sodobna tabela: med 15 in 25%

Če je barva problematične cevi na sredini dveh vzorčnih cevi, je med obema ukrepoma narejena povprečje.

Raztopina vzorca kalijevega dikromata je pripravljena na naslednji način: 7 se meri.9 ml kalijevega dikromata pri 10 N in je v Aggorado žogi do 100 ml do 100 ml. Za redčenja sledi, kot je prikazano v kolorimetrični tabeli Autenrieta.

Kolorimetrična tabela avtieta. Vir: Vásquez a. Ksantoproteična reakcija. Španska klinična revija. 1949; 35 (5): 326-327. Na voljo na: Elsevier

Uporaba

Uporaba ksantoproteične reakcije je del nabora biokemičnih testov, ki pomagajo poznati kemijsko sestavo neznane snovi. Ta test prispeva k kemijski analizi odkrivanje beljakovin, ki vsebujejo benzenične skupine v njihovi strukturi.

To reakcijo široko uporabljajo raziskovalci v različnih študijah snovi.

V tem smislu so Vásquez-JORGE in sodelavci uporabili to in druge reakcije za raziskovanje vsebnosti beljakovin v tekočinah, pridobljenih iz mangrove Ostion (Crassostrea Rhizophorae).

Prav tako so Rojas in sodelavci (2009) uporabili vrsto testov, med katerimi je ksantoprotejska reakcija, da bi analizirali glicomakropéptide v oborini Lactosueros de Ricotta.

Po drugi strani je Becherjeva ksantoproteična reakcija spremenila Volhard, da bi jo uporabili za druge namene. V tem primeru se za odkrivanje fenolnih in indoličnih snovi, ki jih je mogoče dvigniti veliko prej (tedne ali mesece), povečajo ravni sečnine in preostalega dušika v krvi.

Lahko vam služi: Cerio: struktura, lastnosti, pridobivanje, uporabe

Ti strupeni odpadki nastanejo iz črevesne gnilobe hrane.

Te snovi se kopičijo v krvi, kadar niso pravilno odstranjene.

Glede na intenzivnost barve lahko ugotovite, kako napredna je. V tem primeru je test kvantitativen.

Pri zdravih ljudeh ta test daje rahlo rumeno barvo, ki ustreza normalni ravni triptofana in tirozina, ki je lahko v krvi.

Medtem ko pri ledvičnih bolnikih ksantoproteična reakcija daje močno pozitivno zaradi prisotnosti naslednjih snovi: fenol, indol, paracresol, aromatične kisline.

Previdnostni ukrepi

Ta test morajo opraviti usposobljeni strokovnjaki. Upoštevati je treba vse standarde biološke varnosti, ker so uporabljeni reagenti kisline in jedke baze.

Če po naključju nekaj kapljic dušikove kisline na koži ali nohti pade, bosta postala rumena, saj obe strukturi vsebujeta beljakovine. Poleg tega na koži in sluznici povzroči resne opekline.

Če pride do stika s kožo, mora biti protokol, ki ga sledi.

Če si zabrišete oči, se morate umivati ​​z veliko sladko vodo in poskušate ohraniti odprte oči.

Reference

1. "Xantoproteica reakcija" Wikipedia, brezplačna enciklopedija. 2. septembra 2019, 17:49 UTC. 21. oktober 2019, 20:31 Wikipedia.org/
2. Vásquez-Jorge in, Guerra-Molina L, Quintana-Tamayo J, Ramírez-Arzuaga J, Fernando-Ballesteros R, Vásquez-Jorge in. Fizikalno -kemijska karakterizacija in vsebnost beljakovin v izvlečkih tekočine mangrove ostion (Crassostrea Rizofora). Kubanska kemija, 2014; 26 (1): 66–74. Na voljo v Redalyc.
3. Rojas E, Valbuena E, Torres G, García A, Piñero M, Galindo L. Izolacija in delovanje GMP s padavinami LactoSuero s trikloroocetno kislino. Znanstvenik. (Maracaibo) 2009; 19 (3): 295–302. Na voljo na: ve.Scielo.
4. Vásquez a. Ksantoproteična reakcija. Španska klinična revija. 1949; 35 (5): 326-327. Na voljo na: Elsevier
5. Gálvez i, gárate oz. Becher in Andrewes reakcije v urinski kirurgiji. Urologija španske bolnišnice. Argentinska revija urologije 395-404