Tripticaseína Sojina juha Kaj je, temelj, priprava, uporablja

On Tripticaseína Sojina juha Je sred. Zaradi svoje velike vsestranskosti je eden najpogosteje uporabljenih medijev tekočine v mikrobiologiji.

Znano je tudi po imenu triptične soje Tryptic sem Juha ali CST). Njegove uporabe so zelo raznolike zaradi svoje sestave. Sestavljen je iz tripteina, peptona soje, natrijevega klorida, dipotasij in glukoznega fosfata.

Soja soja tripticaseína, posejana s sevom Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, kjer opazimo proizvodnjo pigmenta. Vir: Fotografija avtorja MSC. Marielsa Gil.

Sposoben je reproducirati klinično pomembne patogene bakterije, vključno s tistimi, ki zahtevajo s prehranskega vidika in anaerobne bakterije. V tem mediju se lahko razvijejo tudi nekatere oportunistične in onesnaževalne glive.

Zaradi visoke prehranske moči ima visoko občutljivost za odkrivanje mikrobne kontaminacije, zato jo je izbrala služba za pregledovanje živali in rastlin USDA za mikrobiološko analizo cepiv.

Prav tako sojina juha Tripticaseína izpolnjuje zahteve različnih farmakopejcev (evropski EP, japonski JP in severnoameriški USP) za mikrobiološko študijo izdelkov na industrijski ravni, kot so kozmetična in hrana.

Po drugi strani je treba omeniti, da je kljub veliki uporabi ta medij razmeroma ekonomski, zato je cenovno ugoden za večino mikrobioloških laboratorijev. Poleg tega je zelo enostavno pripraviti.

Osnova

Triptein, peptin in glukoza zagotavljajo bistvene prehranske lastnosti, da bodo idealen medij za hiter razvoj mikrobov.

Vam lahko služi: Linnean taksonomija živih bitij

Približno 6 do 8 ur inkubacije lahko že cenite rast pri večini mikroorganizmov. Vendar obstajajo počasne rastne seve, ki lahko trajajo dneve za rast.

Natrijev klorid in dipotazični fosfat delujeta kot osmotski in pH regulator ravnovesje. Prisotnost rasti dokazuje pojav motnosti na sredini; Če ni rasti, medij ostane prosojni.

Zaradi svoje svetle barve je mogoče opazovati proizvodnjo pigmentov, kot je tisto, prikazano na sliki, ki se nahaja na začetku članka, ki ustreza pigmentu Pseudomonas aeruginosa. 

Priprava

-Tripticaseína Sojina juha

Za pripravo sojine juhe triartiča je treba v digitalnem ravnovesju pretehtati 30 gr dehidriranega komercialnega medija. Nato se raztopi v litru destilirane vode, ki jo vsebuje fixola.

Zmes pustimo v mirovanju 5 minut, nato pa vzame vir toplote, da pomaga srednji raztapljanje. Med vrenjem na 1 minuto ga je treba pogosto vznemirjati.

Ko se raztopi, se po potrebi porazdeli v cevi ustrezne velikosti. Cevi lahko uporabite z bombažnim pokrovčkom ali Baquelita Tapas. Nato se cevi sterilizirajo v avtoklavu pri 121 ° C 15 minut.

Srednji pH mora biti 7,3 ± 0,2

Upoštevati je treba, da je barva dehidrirane kulture bež jasna in jo je treba shraniti med 10 in 35 ° C, na suhem mestu. Medtem ko je pripravljena juha lahka jantarna in jo je treba shraniti v hladilniku (2 do 8 ° C).

-Tripticaseína Sojine variante

Modificirano sojino juho triptikazeino lahko pripravimo z dodajanjem žolčnih soli in novobiocina, da bi to lahko selektivno za izolacijo In. coli. Druga možnost za isti namen je priprava sojine sojine juhe, dopolnjene z vankomicinom, cephixime in teluritom (2,5 µg/ml).

Vam lahko služi: 25 primerov aseksualne reprodukcije

Po drugi strani pa lahko v sojino juho tripticaseína dodamo več glukoze (0,25%), ko je cilj spodbuditi tvorbo biofilmov.

Uporaba

Je dovolj hranljiv, da omogoča rast zahtevnih ali nadležnih bakterij, kot so Streptococcus pneumoniae, Streptococcus sp in Brucella sp, Ni treba dopolniti s krvjo ali serumom.

Prav tako se lahko v tej juhi razvijejo nekatere glive, na primer Kompleks Candida albicans, Aspergillus sp in Histoplasma capsulatum.

Poleg tega je ta medij v anaerobnih pogojih idealen za obnovitev bakterij, ki pripadajo spolu Clostridium, pa tudi anaerobne bakterije, ki niso sporulirane iz kliničnega pomena.

Če dodamo 6,5% natrijevega klorida, ga lahko uporabimo za rast enterokoka in drugih streptokokov skupine D.

Na ravni raziskave je bil zelo koristen v različnih protokolih, zlasti pri preučevanju biofilmov ali biofilmov, ki tvorijo bakterije. Uporablja se tudi za pripravo 0,5 -odstotne bakterijske suspenzije Mac Farland, ki je potrebna za izvedbo antibiograma po metodi Kirby in Bauer.

V tem primeru jemljemo 3 do 5 kolonij podobnega videza in emulgirano v 4-5 ml soje Tripticasein. Nato ga inkubiramo 2 do 6 ur pri 35-37 ° C in nato ustreza želeni koncentraciji z uporabo sterilne raztopine fiziološke raztopine. Tripticasein sojine budnosti ne smete uporabljati od 18 do 24 ur inkubacije.

Posejan

Vzorec je mogoče sejemo neposredno ali čiste kolonije, vzete iz selektivnih sredstev. Inokulum mora biti majhen, da ne bi pred inkubacijo zamazali medij.

Običajno ga inkubiramo pri 37 ° C v aerobiozi 24 ur, vendar se ta stanja lahko razlikujejo glede na mikroorganizem. Lahko ga inkubiramo tudi v pogojih anaerobioze pri 37 ° C več dni, če je potrebno. Na primer, pri zahtevnih mikroorganizmih ali počasni rasti ga lahko inkubiramo do 7 dni.

Vam lahko služi: krompirjev agar dekstroze: temelj, priprava in uporaba

V mikrobiološki analizi farmacevtskih snovi - kot cepiva - so protokoli strožji. V teh primerih juha brez rasti ne izključuje, dokler ne izpolnjuje 14 dni neprekinjene inkubacije.

QA

Iz vsake pripravljene parcele je treba inkubirati 1 ali 2 cevi, da se pokažejo njeno sterilnost. Mora ostati brez sprememb.

Za oceno svojega vedenja lahko sejete tudi znane seve. Med sevi, ki jih je mogoče uporabiti, so:

Aspergillus brasiliensis ATCC 1604, Candida albicans ATCC 10231, Bacillus subtilis ATCC 6633, zlati stafilokok ATCC 6538 ali 25923, Escherichia coli ATCC 8739,  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305, Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Salmonella tiphimurium ATCC 14028.

V vseh primerih mora biti rast v atmosferi zadovoljiva in ustrezna temperatura za vsak mikroorganizem.

Omejitve

-Fermentacija glukoze povzroči spust srednjega pH s proizvodnjo kisline. To je lahko neugodno za preživetje nekaterih kislosti, občutljivih mikroorganizmov.

-Za vzdrževanje sevov ni priporočljivo, ker bakterije poleg kislosti po nekaj dneh izpušne hranilne snovi s posledično kopičenjem strupenih snovi, ki omogočajo nevzdržno okolje.

-Morate delati in skrbeti za vse protokole sterilnosti, saj so juhe zlahka onesnažene.

-Po pripravi sojinih juh triptikaseina je ne smete poskušati prenesti juhe za drugo sterilno cev, ker je ta vrsta manevrov zelo ranljiva za kontaminacijo.

Reference

1. Britanski laboratorij. Sojina juha tripteine. Na voljo na: Britanaalab.com
2. MCD laboratorij. Tripticaseína Sojina juha. Na voljo na: elektronski sistemi.com
3. Neogen laboratorij.  Triptych Sojina juha. Na voljo na: FoodSafety.Neogen.com