EC delež, priprave in uporabe

On EC juha ali juha Escherichia coli Je selektivni medij za tekočino. Ta medij priporočamo s standardnimi metodami za štetje skupnih in fekalnih koliform, ki jih je najverjetnejša tehnika (NMP) v vzorcih vode in hrane, kjer je vpleteno glavno sredstvo Escherichia coli.

EC juha sestavljajo triptein, laktoza, žolčne soli, pipotazični fosfat, monopotazični fosfat, natrijev klorid in voda. Njegova formula je strateško zasnovana tako, da daje prednost rasti skupnih in fekalnih koliform in preprečuje razvoj drugih spremljajočih mikroorganizmov.

Figurativni prikaz priprave juhe EC. Vir: Pixabay.com

Bakterije Escherichia coli Je glavni fekalni koliform, ki je prisoten kot onesnaževal v virih vode in hrane, kar je vzrok za pomembne učinke prebavil.

Treba je opozoriti, da obstaja veliko serotipov Escherchia coli; Med njimi lahko omenjamo Enterohemorrágica (EHEC), Enteroinvazive (EICE), enteopatogeni (EPEC), enterotoksigeni (ETEC) in enteroagregativ (EAEC).

Ta medij lahko omogoči razvoj vseh njih, vendar jih ne more razlikovati drug od drugega. Za to je treba opraviti dodatne teste.

Mikrobiološka študija vode in hrane za najverjetnejše število (NMP) za iskanje skupnih in fekalnih koliform je protokol, ki je sestavljen iz več faz; domnevna faza, potrditvena faza in faza dokončanja. EC juha se uporablja v potrditveni fazi.

[TOC]

Osnova

EC juha

Medij ES temelji na zagotavljanju potrebnih prehranskih elementov za optimalni razvoj skupnih in fekalnih koliform, kjer so vključene bakterije Escherichia coli.

Te prehranske elemente zagotavlja Triptein, ki je odličen vir peptidov in aminokislin. Poleg tega vsebuje tudi laktozo, fermentirano ogljikovo hidrat, ki zagotavlja energijo in vam omogoča, da pokažete, ali bakterija proizvaja plin.

Po drugi strani medij vsebuje žolčne soli, ki zagotavljajo selektivno naravo, saj zavira rast gram pozitivnih mikroorganizmov, ki so lahko prisotni v vzorcu.

Lahko vam služi: flora in favna Nuevo León

Prav tako dipotasijski fosfat. Ta sistem je potreben, ker laktoza, ki jo vsebuje juha.

Zato so ti elementi bistveni, saj lahko kislost brez nadzora vpliva na dober razvoj iskanih mikroorganizmov.

Natrijev klorid je stabilizirajo okolje, voda pa je topilo prisotnih in zagotavlja tekočo skladnost okolju.

EC juha, spremenjena z Novobiocinom

Okrend in Rose sta ustvarila različne juhe EC, imenovana EC Modified EC juha. Sprememba je bila sestavljena iz zmanjšanja koncentracije žolčnih soli in agregata 20 mg/dl Novobiocine.

Ta sprememba daje prednost okrevanju sevov Escherichia coli Enterohemorrágica (O157: H7).

Ta bakterijski serotip povzroči hud hemoragični kolitis, ki lahko povzroči hemolitični uremični sindrom (SUH); kar lahko povzroči akutno ledvično odpoved z visoko stopnjo umrljivosti, ki lahko pri starejših doseže do 50%.

Zaradi morbidne, ki jih ta bakterije povzročajo za uživanje onesnažene hrane, ameriško ministrstvo za kmetijstvo (USDA) zelo priporoča uporabo tega medija.

Priprava

EC juha

Tehtamo 37,4 gr dehidriranega medija in se raztopimo v 1 liter destilirane vode. Zmes je treba pustiti 5 minut. Nato v viru toplote na koncu pogosto raztaplja mahanje.

Ko se raztopi, se porazdeli v epruvete, ki so prej kondicionirane s cevjo Durham v notranjosti. Sterilizirajte v avtoklavu pri 121 ° C 15 minut.

Vam lahko služi: sfingomielin: kaj je, struktura, funkcije, sinteza

Srednji pH mora biti 6,9 ± 0,2.  Barva dehidriranega medija je bež in pripravljena je jasna jantarna.

Juhe so shranjene v hladilniku do uporabe. V času uporabe morajo biti juhe pri sobni temperaturi.

Po drugi strani pa lahko EC juha pripravite tudi v dvojni koncentraciji.

EC juha, spremenjena z Novobiocinom

Tehtamo 36,7 gr dehidriranega medija in se raztopi v 1 liter vode. Preostali del priprave je enak zgoraj opisanemu.

Uporaba

Analiza skupne in fekalne koliforme

EC juha je idealna za potrditveno fazo študije koliform po metodi NMP, tako v vzorcih vode, kot v farmacevtskih kot prehranskih izdelkih.

Tesnejše in plinske proizvodne juhe, ki jih dobimo v domnevni fazi.

Za skupne koliforme EC juhe inkubirajo v aerobiozi 24 do 48 ur pri 37 ° C, za fekalne koliforme pa jih inkubiramo v aerobiozi 24 do 48 ur pri 44 ° C.

V obeh primerih se razlaga na naslednji način: Mračne cevi s proizvodnjo plina se štejejo za pozitivne. Če v 24 urah ne bo proizvodnja plina nadaljevala inkubacija do 48 ur.

Pozitivne juhe EC gredo v popolno potrditveno fazo, ki je sestavljena iz nagrajevanja v selektivnih medijih, kot so Mac Conkey, EMB ali Endo Endo Agar.

Če je uporabljena juha spremenjena z Novobiocinom, se priporočamo pozitivne cevi, da se spominjajo na Mac Conkey Agar s sorbitolom.

QA

Nadzor kakovosti je treba opraviti iz vsake pripravljene srednje serije. V prvi vrsti mora sterilnost okolja. V tem smislu se inkubirajo ena ali dve juhi brez inokuliranja v aerobiozi 24 ur pri 37 ° C. Pričakovani rezultat je prozorna juha, brez motnosti ali spremembe barve.

Vam lahko služi: medvrstna usposobljenost: značilnosti in primeri

Drugič, rast znanih sevov je treba ovrednotiti, saj lahko to uporabite naslednje bakterije: Escherichia coli, ATCC 8739, Escherichia coli ATCC 25922, Salmonella tiphimurium ATCC 14028.

V vseh primerih se pričakuje zadovoljiv mikrobni razvoj, pri čemer opazujemo oblačno juho s proizvodnjo plina za In. coli In brez plina za salmonelo.

Drugi sevi, ki jih je mogoče vključiti v nadzor, so: zlati stafilokok ATCC 25923, Enterococcus faecalis ATCC 29212. Ti sevi morajo biti popolnoma zavirani.

priporočila

-Namestitev cevi Durham je nepogrešljiva za preučevanje koliform.

-Pred sterilizacijo razdelite medij v epruvetah, nikoli po.

-Ne uporabljajte, če ima medij več kot 3 mesece pripravljen.

-Ne uporabljajte, če opazimo kakšno spremembo običajnih značilnosti medija.

Reference

1. Britanski laboratoriji. Srednja EC. 2015. Na voljo na: Britanaalab.com
2. In. coli Enterohemoragik. Center za preskrbo s hrano in javno zdravje. 2010. Na voljo na: CFSPH.iastate.Edu
3. Korporacija Neogen. Srednja EC. Na voljo na: FoodSafety.Neogen.com
4. Neogen. Medificirana EC, spremenjena z Novobiocino. Na voljo na: FoodSafety.Neogen.com
5. Jure M, Condorí S, Leotta G, Chinen I, Miliwebsky E, Allori C, Aulet O, Avtor Castillo M. Odkrivanje, izolacija in karakterizacija Escherichia coli Proizvajalec toksinov Shiga iz svežega mletega mesa iz Butchers of Concepón, provinca Tucumán. Rev arg mikrobiola; 2010, 42 (4): 284–287.  Na voljo na: www.Scielo.org.