Fundacija Agar XLD, priprava in uporaba

On XLD agar o Acho xilosa lizin desoksikat je selektivna in diferencialna trdna kultura za enteropatogeno izolacijo. Taylor je oblikovala formulo XL agar (Xylose, lizin), da bi izboljšala izolacijo rodu Shigella.

Opozoril je, da je bil ta žanr zaviran v večini medijev, namenjenih za izolacijo enteropatogena. Nato so mu dodali natrijev deksikolat, natrijev tiosulfat in železov amonični citrat, da bi povečali njegovo selektivnost. Ta formula se je izkazala za koristno tako za Shigello kot za izolacijo salmonele.

Razlike od kolonij Shigella, salmonele in koliform v agarju XLD. Do. Shigella sp, b. Salmonella sp, c. Koliforme. Viri: a. Avtor: CDC/ Amanda Moore, MT; Todd Parker, doktor znanosti; Audra Marsh, vljudnost: Knjižnica slik za javno zdravje B. https: // nalaganje.Wikimedia.org/wikipedia/commons/1/1f/salmonella_species_growing_on_xld_agar _-_ show_h2s_production _- _ podrobnosti.JPG c. Avtor: CDC/DR. J. J. Kmet, vljudnost: knjižnica slik za javno zdravje

Agar XLD je sestavljen iz ekstrakta kvasa, natrija, ksiloze, lizina, laktoze, saharoze, natrijevega tiosulfata, železovega amonijevega citrata, natrijevega klorida, rdečega fenola in agarja in agarja in agar. V večini bakterioloških laboratorijev se za preučevanje fekalnih vzorcev v iskanju Shigella in Salmonella uporablja duet agar XLD in SS agar.

Drugi laboratoriji raje kombinacijo Chromagar Salmonella in Agar XLD, med drugim na voljo. Ti dvojci lahko pripravite v dvojnih petrijskih ploščah. Na eni strani postavijo agar xld, na nasprotni strani.

[TOC]

Osnova

-Prehranska moč

Agar XLD ima ekstrakt kvasovk, ki služi kot vir hranilnih snovi za mikroorganizme, ki se razvijajo v tem agaru. Poleg tega prisotnost ogljikovih hidratov (ksiloza, saharoza in laktoza) zagotavlja energijo bakterijam, ki jih lahko fermentirajo.

-Srednja selektivnost

Kot zaviralna snov predstavlja postavitev natrija; To preprečuje rast gram pozitivnih bakterij, kar daje srednje selektivni značaj.

-Diferencialna moč

Tipične kolonije Shigella

Kot smo že omenili, XLD agar vsebuje ksilozo; Ta ogljik hidrat fermentira vse bakterije, ki rastejo v tem mediju, razen rodu Shigella.

Vam lahko služi: Hardy-Weinberg Law

To je ena od značilnosti, ki jih ponuja njegov diferencialni značaj, saj Shigellove kolonije ločijo ostalo z razvojem rdečih kolonij, druge bakterije pa rumene kolonije.

Tipične kolonije salmonele

Salmonela spola tudi fermentira ksilozo in sprva ustvarja rumene kolonije. Vendar po izčrpanju ksiloznega ogljikovega hidrata napade lizin s svojim encimom lizin dekarboksilazo. Lizin dekarboksilacija ustvarja alkalije, ki naredijo barvo kolonije in prvotno rdečo barvo originalno rdečo.

To vedenje izvaja samo salmonela, saj koliformi, ki dekarboksila. To je zato, ker koliformi fermentirajo tudi laktozo in saharozo; Zato je proizvodnja kisline zelo velika, v teh bakterijah pa pušča rumeno kolonijo.

Treba je opozoriti, da spolna salmonela ne fermentira saharoze niti laktoze.

H₂S

Agar XLD omogoča tudi odkrivanje vrst proizvajalcev salmonele H₂S; Za to ima vir sulfida, ki ga predstavlja natrijev tiosulfat, in reakcijski razvijalec, ki je železov amonijev citrat.

Slednji reagira s h₂S (brezbarven plin) in tvori vidno črno oborino netopnega železnega sulfata. V tem smislu bodo značilnosti kolonije Salmonelle rdeče s črnim centrom.

Treba je opozoriti, da za reakcijo h₂S, potreben je alkalni pH. Zato druge enterobakterije, ki tvorijo h₂V tem okolju tega ne morejo ali slabo, saj visoka kislost, ki jo proizvajajo, ko fermentirajo ogljikovi hidrati, zavirajo ali ovirajo reakcijo.

-Natrijev klorid, agar in fenol rdeča

Končno natrijev klorid vzdržuje osmotsko ravnovesje; Agar je strjevanje sredstva in rdeča fenola zazna spremembe pH, ki obrača barvo kolonij in medij.

Priprava

Tehtamo 55 gr xld dehidrirane in se raztopi v 1 liter vode. Mešanico segrejte in stresajte, dokler ne doseže vrelišča. Ne pregrejte, saj toplota poškoduje medij in ustvari oborino, ki spreminja morfologijo tipičnih kolonij.

Vam lahko služi: proteoglikani

Ta medij ne sme biti avtoklaviran. Ko se raztapljate, morate preiti v kopalnico od 50 ° C. Kadar je treba hladiti neposredno na sterilnih ploščah Petri. Lahko jih razjasnimo v preproste ali dvojne krožnike. Do uporabe se lahko utrdijo in hranijo v hladilniku.

Pred uporabo. Kot je nesteriliziran medij, ga priporočamo, da ga pripravite blizu datuma uporabe.

Končni pH medija mora biti na 7,4 ± 0,2. Barva pripravljenega je oranžno rdeča, prosojna, brez oborine.

Če je dodan lizin ksilozni agar (XL), lahko dodamo natrij, natrijev tiosulfat in amonični železni citrat. Na ta način dobimo formulo XLD agar.

Prijave

Agar XLD se uporablja za obnovitev enteropatogenov, predvsem iz rodu Shigella in drugič od spolne salmonele. Uporabno je za oceno vzorcev blata, vode in hrane.

Vrste vzorcev

Blato

Vzorce blata je mogoče sejati neposredno v agar XLD, kar dobro porazdeli material za pridobitev izoliranih kolonij.

Za izboljšanje okrevanja salmonele se je XLD strinjal iz obogatitvenih sredstev za salmonelo.

Hrana

V primeru hrane se lahko obogatitvene juhe uporabljajo za salmonelo in Shigella. Za salmonelo lahko med drugim uporabite cistin selenito juhe, svetlo zeleno tetracijsko juho.

V primeru Shigella ga je mogoče obogatiti z juho Shigella z 0,5 µ/ml Novobiocine, inkubirane pri 42 ° ± 1 ° C 16-20 ur.

Voda

Pri analizi vode med drugim priporočamo tehniko filtracije membrane in uporaba XLD agar.

Posejani in identifikacijski pogoji

Sejanski medij inkubiramo v aerobiozi pri 35 ° C 24 do 48 ur.

Lahko vam služi: Indijska flora in favna

Opažene so značilne kolonije vsakega žanra, sumljive kolonije je treba opraviti biokemične teste za identifikacijo.

QA

Za oceno srednjega nadzora kakovosti lahko uporabimo naslednje bakterijske seve: Salmonella tiphimurium ATCC 14028, Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella Abony DSM 4224, Shigella Flexneri ATCC 12022, Shigella Sonnei ATCC 25931, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 33495.

Za rod salmonele je značilno, da se v tej srednje rdeči kolonijah predstavi s črnim središčem ali popolnoma črnimi kolonijami. Medtem ko morajo biti v rodu Shigella kolonije rdeče, to je barva medija.

V primeru Escherichia coli Pričakuje se, da bo popolnoma ali delno zaviran; Če kolonije rastejo, so rumene. Za Proteus mirabilis Pričakuje se malo rasti z rožnatimi kolonijami s črnim centrom ali brez njega. Končno bo rod Klebsiella zrasel kot rumene kolonije.

Končni premisleki

Agar XLD se v bakterioloških laboratorijih zelo uporablja za njegovo visoko učinkovitost za okrevanje Shigelle in ima tudi dobro okrevanje rodu Salmonella.

Rall in sodelavci (2005) v svojem delu z naslovom "Ocenjevanje treh obogatitvenih juhe in pet trdnih medijev za odkrivanje salmonele v perutnini" je pokazalo, da je dokazano 3 klasične medije (Bright Green Agar, SS in agar XLD), Agar XLD pridobil najboljšo stopnjo okrevanja.

Odstotek okrevanja je bil naslednji: 13.8% za svetlo zeleni agar, 27.6% za SS in 34.5% za XLD. Presegel ga je le kromogeni medijski agar Rambach s 48% okrevanjem in kromagarjem s 79.3%.

Reference

1. Bolezni, ki se prenašajo s hrano. Shigellosis. Na voljo na: anmat.Gov.ar
2. »Agar XLD." Wikipedia, brezplačna enciklopedija. 9. februar 2019, 11:46 UTC. 10. april 2019, 19:25 Wikipedia.org
3. BBL laboratoriji. Kromagar salmonella / bd xld agar (bipacca).2013 Na voljo na: BD.com
4. Laboratorij. Neogen. XLD agar. Na voljo na: FoodSafety.Neogen
5. Laboratorij Francisco Soria Melguizo. XLD agar. Dostopno na: http: // f-soria.Je/informiranje
6. Rall L, Rall R, Aragon C, Silva M. Vrednotenje treh obogatenih bruttov in petih medijev za odkrivanje salmonele pri perutnini. BRAZ. J. Mikrobiol.  2005; 36 (2): 147-150. Na voljo pri: Scielo.Br
7. Forbes B, Sahm D, Weissfeld a. (2009). Mikrobiološka diagnoza Bailey & Scott. 12 ed. Pan -ameriški uredništvo s.Do. Argentina.