Svetlo zeleni agar, fundacija, priprava, uporaba

On Svetlo zeleni agar Je trden kulturni medij, z visoko stopnjo selektivnosti. Uporablja se izključno za izolacijo sevov rodu salmonele; Vendar pa obstajajo nekatere izjeme, na primer vrste Typhi in Paratiphi, ki v tem mediju ne rastejo.

Iskanje žanra salmonele je pogosto v vzorcih blata, vode ali hrane. V tem smislu je ta medij lahko zelo koristen. Ta agar so leta 1925 ustvarili Kristensen, Lester in Jurgens, pozneje pa je Kauffmann spremenil.

Sestavljen je iz multiplayone iz prebavljenega peptičnega in digrealnega kazeina v živali.

Za večino bakterij je značilno, da je dokaj nevljuben medij, ki daje prednost rasti salmonele, vendar so nekateri koliformi sposobni v njem in se šibko razvijajo.

Pomembno je poudariti, da v tem mediju žanr Shigella ne raste in niti enega Salmonella tiphimurium, niti Salmonella Paratiphi. Če želite izolirati te mikroorganizme, je treba med drugim uporabiti druge medije, na primer agar XLD.

Osnova

Svetlo zeleni agar

Vsaka komponenta, ki sestavlja medij, izpolnjuje posebno funkcijo, ki določa značilnosti in lastnosti agarja.

Pluripeptoni in ekstrakt kvasovk so vir hranil, kjer mikroorganizmi jemljejo dušik in minerale, potrebne za njihov razvoj. Laktoza in saharoza sta viri energije za mikroorganizme, ki jih lahko fermentirajo.

Svetlo zelena je zaviralna snov, ki preprečuje razvoj gram pozitivnih bakterij in veliko število gram negativnih mikroorganizmov.

Vam lahko služi: troponin: značilnosti, struktura, funkcije in testi

Natrijev klorid zagotavlja osmotsko stabilnost okolju. Medtem ko je rdeči fenol indikator pH, enaka barvna vira pri zaznavanju proizvodnje kislin iz fermentacije ogljikovih hidratov.

Ne -fermentacijske kolonije laktoze in saharoze rastejo v tem mediju bele ali prozorne bele barve, na rdečem ozadju. Na primer, bakterije rodu salmonele.

Medtem ko laktoze ali saharozne fermentirane bakterije, ki lahko rastejo v tem mediju, razvijejo rumeno ali rumenkasto rumeno barvo, na zelenkasto rumenem ozadju. Na primer, Escherichia coli in Klebsiella pneumoniae.

Svetlo zelene različice agarja (BGA)

Obstajajo tudi druge različice svetlo zelenega agarja; Svetlo zelena zelena Girvobiocin APAR (NBG) in briljantna pohlep sta rasla avocinska laktoza glicerola (NBGL).

Svetlo zelena agar glukoza Novobiocin (NBG)

Vsebuje sojino kmetijstvo, železov amonijev citro.

Uporablja se za izolacijo kolonij salmonele iz vzorcev blata.

V tem primeru sta svetlo zelena in novobiocin zaviralne snovi, ki preprečujejo rast gram pozitivnih bakterij in nekaj gram negativnih mikroorganizmov.

Natrijev tiosulfat je vir žvepla in železov citrat je vir železa, oba pa je potrebna za razkritje proizvodnje vodikovega sulfida s tvorbo črne oborine železovega sulfida.

Glukoza je fermentacija ogljikovih hidratov in fenol rdeča je indikator pH.

V tem mediju se kolonije salmonele razvijejo velike s črnim središča, obkroženo z rdečkasto halo in sledi jasno vidno območje. Nekaj ​​sevov Citrobacter freundii proizvajajo enake kolonije kot salmonela.

Lahko vam služi: flora in favna iz Duranga: reprezentativna vrsta

Briljantna glicerol zelena zelena avobiocin laktoza glicerol (NBGL)

Ta medij vsebuje sojino kmetijstvo, železov amonijev citrat, natrijev tiosulfat, laktozo, glicerol, svetlo zeleno, novobiocin in destilirano vodo.

Razlika v tem mediju s prejšnjim.

Medij se uporablja tudi za izolacijo vrst salmonele, kolonije se razvijejo črno, s proizvodnjo vodikovega sulfida.

Samo kolonije, ki ne proizvajajo kisline iz glicerola ali laktoze, dosežejo h₂Je dovolj, ker pH pod poseganjem v tvorbo h₂S. To ima za posledico brezbarvne kolonije za večino vrste Proteus in Cytrobacter.

Priprava

-Tehtamo 58 gramov dehidriranega medija, pridobljenih komercialnih. Dodajte ga v liter zasušene vode. Zmešajte, pustite nekaj minut in pošljite pripravo na vir toplote, dokler se popolnoma ne raztopi.

-Autoclave pri 121 ° C 15 minut, ne presegajte časa sterilizacije.

-Pustite, da stojite in postrezite še vedno vroče na sterilnih krožnikih Petri. Končni pH mora biti 6,9 ± 0,2.

-Do uporabe naj se strdi in shrani v hladilniku. Pred setvijo krožnikov morajo vzeti sobno temperaturo.

-Prašek je zelen in pripravljen je oranžno-rjav ali rdečkasto zelenkasto barvo, odvisno od pH in komercialne hiše. Zelo rjava barva kaže, da je bil agar pregret.

-Ko agar ni priporočljiv, ga ni priporočljivo graditi, ker se medij poslabša.

Uporaba/aplikacije

Ta medij se med drugim uporablja za iskanje sevov rodu salmonele vzorcev iztrebkov in mlečne hrane.

Vam lahko služi: fosfatidilserin: struktura, sinteza, funkcije, lokacija

Ker je dokaj nevljudno sredstvo, je priporočljivo sejati obilno inokulum, če se uporablja neposreden vzorec. V nasprotnem primeru je treba pred setvijo v tem mediju opraviti prednastavitev in obogatitev osebkov.

Ker se nekateri sevi salmonele zavirajo ali rastejo s težavami, je priporočljivo, da ta medij spremljate z drugimi selektivnimi starostmi za salmonelo.

Vsako kolonijo s tipično značilnostjo salmonele je treba podpraviti z biokemičnimi testi za dokončno identifikacijo.

QA

Za preizkus pravilnega delovanja svetlo zelenega agarja. Za opazovanje njihovega razvoja na njem lahko uporabite seve ATCC.

Najpogostejši sevi, ki se uporabljajo za nadzor kakovosti, so: Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella tiphimurium ATCC 14028, Proteus mirabilis ATCC 43071, Klebsiella pneumoniae ATCC 700603, Escherichia coli ATCC 25922,  Shigella Flexneri ATCC 12022, zlati stafilokok ATCC 6538.

Prvi 3 morajo na rdečem ozadju dati roza ali prozorne bele kolonije. Salmonela z dobrim razvojem in proteusom z malo ali redno rastjo.

Za Klebsiella in Escherichia pričakujemo zelenkaste rumene kolonije z rumenim ozadjem, v primeru Shigella in Staphylococcus pa jih je treba zavirati.

Dehidrirani medij mora biti shranjen pri sobni temperaturi, na suhem, ker je medij zelo higroskopski.

Reference

1. Britanski laboratorij. Svetlo zeleni agar. 
2. BD laboratorij. Bd briljantni zeleni agar.