Bhi agar kaj je, fundacija, priprava, uporablja

On Bhi agar o infuzija možganskega srca. Je hranljiv medij za trdno kulturo. V španščini ga navajamo kot infuzijski cerebro srčni agar. Gre za neselektivni medij za kulturo, kar pomeni, da se lahko razvijejo vse vrste gram pozitivnih in gram negativnih bakterij, pa tudi nekaj kvasovk in nitastih gliv.

Sestavljen je iz možganske infuzije in telečk srca, peptičnega hidroliza na živali.

Treba je opozoriti, da je BHI Agar eden najpogostejših kulturnih medijev v bakterioloških laboratorijih. Uporablja se lahko brez dodatkov kot primarni, subjektiv za kolonije, pridobljene v drugih selektivnih medijih, ali za vzdrževanje sevov v laboratoriju.

Po drugi strani je idealno sredstvo, ki ga je treba uporabiti kot osnovo pri pripravi obogatenih medijev, kot sta krvni agar in čokoladni agar. Oba ideala za izolacijo zahtevnih mikroorganizmov s prehranskega vidika. Vendar je treba upoštevati, da ker vsebuje glukozo, ni primeren za opazovanje vzorcev hemolize.

Prav tako se lahko BHI agar uporabi za pripravo posebnih sredstev za izolacijo patogenih mikroorganizmov težke rasti v skupnih medijih, vključno z: Haemophilus sp, Francisella tularensis, Corynebacterium diftheriae in histoplasma capsulatum.

Z aditivom za antibiotike BHI agar postane selektivni medij za glivično izolacijo.

Osnova

Je hranljiv kulturni medij za izolacijo zmerno zahtevnih mikroorganizmov, ki lahko poveča svojo obogatitev z dodajanjem krvi in ​​drugih hranljivih dodatkov.

To je neselektivni medij za kulturo, zato omogoča rast najbolj pozitivnih in gram negativnih bakterij, pa tudi nekatere glive. Vendar lahko postane selektiven z dodajanjem antibiotikov.

Medij vsebuje infuzijo možganskega in telečjim srcem, hidrolizirano živalsko tkivo in hidrolizirano tkivo kazeina trebušne slinavke; Vse te spojine delujejo kot viri vitaminov, aminokislin, dušika in ogljika.

Vam lahko služi: flora in favna iz Entre Ríos: reprezentativne vrste

Glukoza je ogljikovi hidrat, ki mikroorganizmom zagotavlja energijo, ko ga fermentirajo. Medtem ko natrijev klorid in disodijev fosfat vzdržujeta osmotsko ravnovesje in zagotavljata pH blizu nevtralnosti. Končno agar daje trdno doslednost okolju.

Priprava

Tehtamo 52 gramov dehidriranega medija in se raztopimo v litru destilirane vode. Mešanico odnesite do vira toplote, dokler ne zavre, med postopkom raztapljanja pogosto agitirajte.

Brez dodatkov lahko pripravite klini ali plošče agar agarja.

Klini

Za pripravo klina se postrezite s pripravo, dokler ne izpolnijo polovice vsake cevi, pokrijejo in sterilizirajo v avtoklavi pri 121 ° C 15 minut, ko gredo spat na podlago, dokler se ne strdi. Nato hranite v hladilniku do uporabe.

BHI klini za Bactereteca. Vir: Fotografija avtorja MSC. Marielsa Gil.

Krožnike

Raztopljena zmes je avtoklava pri 121 ° C 15 minut, ko zapusti, da se ohladi do 50 ° C in jih postrežemo 20 ml medija v sterilnih ploščah Petri. Dovoljejo jih, da se strnijo, vlagajo in shranijo v hladilnik, dokler ne uporabljajo. Plošča naj vzamejo temperaturo okolice pred setvijo.

Srednji pH mora biti 7,4 ± 0,2.

Nepripravljen medij je bež in pripravljen je lahka jantarna.

Krvni agar

Po sterilizaciji medija ohladite do približno temperature 45 do 50 ° C, takrat dodajte kri (50 ml), nežno premešajte homogeniziranje in postrezite 20 ml na vsaki Petrijski plošči. Če se na plošči oblikujejo mehurčki, je treba hitro prenesti lažji plamen na mehurčkih, da jih odstranite.

Prav tako lahko posebne medije pripravimo z dodajanjem ustreznih dodatkov, ko zmes doseže temperaturo od 45 do 50 ° C.

Vam lahko služi: fizične zmogljivosti

Medij je češnjeva rdeča.

Prijave

Uporaba brez dodatkov

BHI agar brez dodatkov je uporaben kot primarno gojenje in sejati čiste seve mikroorganizmov malo ali zmerno zahtevno za njegovo poznejšo identifikacijo.

Ker je svetlo barvni medij, je idealen za opazovanje pigmentov in tudi tako, da ne vsebuje interferenčnih snovi, nekaj biokemičnih testov, kot sta oksidaza in katalaza, ali namestitev drugih biokemičnih testov iz kolonij iz tega agarja.

Prav tako so bhi agar široki.

Plošče ali klini, posajeni s površino z bakterijskimi sevi, se 24 do 48 ur inkubirajo pri 37 ° C. Medtem ko bo v glivah temperatura in čas inkubacije odvisna od vrste glive, ki se iščejo.

Kot osnovni agar za pripravo drugih medijev

S to bazo lahko pripravite obogatene in selektivne medije.

Obogaten

Njegova glavna funkcija je, da služi kot osnova pri pripravi rutinske krvi v mikrobioloških laboratorijih. Še posebej baza BHI pripomore k izolaciji sevov Streptococcus sp. Vendar ima neprijetnost, da ni primeren za opazovanje vzorcev hemolize z vsebino glukoze.

Uporablja se tudi pri pripravi zajce ali konjske krvi Haemophilus sp. Za boljše rezultate lahko dodate dodatek za obogatitev (Isavalex).

Če vzorci prihajajo iz dihalnega trakta do agarja, lahko dodamo bacitracin, da zavirajo spremljajočo floro in povečajo verjetnost okrevanja sevov sevov Haemophilus sp.

Po drugi strani pa lahko s Cistino Tellurito pripravite kri (jagnjetino ali človeško), da izolirate Corynebacterium diftheriae. Prav tako je koristno za pripravo kunčje krvi, z agregatom cistina in glukoze za izolacijo Francisella tularensis.

Setev krvnih agar plošč se opravi z izčrpanostjo in inkubiramo pri 35-37 ° C 24-48 ur v mikroaerofiliji (5-10% CO₂).

Vam lahko služi: filogenetsko drevo: vrste in njihove značilnosti, primeri

Selektivno

Ta medij z agregatom antibiotikov lahko nadomesti agar Sabouraud za glivično izolacijo.

Agar BHI v kombinaciji s kloramfenikolom - gentamicinom ali penicilinom -, streptomicinom in konjsko kri je idealen za izolacijo Histoplasma capsulatum.

Odvisno od mikroorganizma, ki ga je treba izolirati inkubacijo pri 35-37 ° C ali pri sobni temperaturi pri aerobiozi. Včasih je inkubacija v obeh temperaturnih območjih potrebna z uporabo 2 ploščic za to.

Nekatere glive so všeč Trichophyton Mentagrophytes Inkubirajo jih pri sobni temperaturi do 7 dni.

QA

Iz vsake pripravljene parcele je priporočljivo 24 ur inkubirati 1 ploščo ali klin pri 37 ° C in preveriti, ali ni rasti; Še posebej je pomembno pri pripravi krvi, ker je zlahka onesnaben medij.

Po drugi strani je mogoče kakovost medija ovrednotiti inokuliranje znanih ali certificiranih vzorcev in opazovanje njegovega razvoja.

V tem smislu za oceno agarja BHI brez dodatkov lahko uporabite seve Escherichia coli ATCC 25922, zlati stafilokok ATCC 25923 o Candida albicans ATCC 10231. 37 ° C se inkubirajo v aerobiozi 24 do 48 ur. V vseh primerih se pričakuje zadovoljiva rast.

Za oceno krvnih agar plošč lahko posejate seve  Streptococcus pyogenes ATCC 19615, Streptococcus pneumoniae ATCC 6305 oz Trichophyton Mentagrophytes ATCC 9533.

Bakterijski sevi inkubiramo pri 37 ° C v mikroaerofiliji 24 ur, glive pa inkubirajo pri sobni temperaturi v vlažni komori. V vseh primerih se pričakuje zadovoljiva rast.

Reference

1. Britanski laboratoriji. Infuzijski agar možganskega srca. Na voljo na: Britanaalab.com.
2. BD laboratoriji. Infuzija možganskega srca (BHI) agar. Na voljo na: BD.com.