Preprosto obarvanje

Kaj je preprosto obarvanje?

The Preprosto obarvanje Gre za hiter in preprost postopek obarvanja, v katerem se uporablja eno samo barvilo, zato se imenuje preprosto. Uporablja se predvsem za določanje morfologije in organizacije celic, prisotnih v vzorcu.

Seveda celice nimajo barve, zato jih je treba narediti na nek način, ko jih opazimo v mikroskopu.

Pomembno je poudariti, da morajo biti barvila, ki se uporabljajo pri preprostem obarvanju.

Te celične strukture so negativno nabiti. Zato barvilo, pozitivno nabito, privlači celice in se jim spontano pridruži. Tako so vse celice, prisotne v vzorcu, hitro obarvane.

Barvne barve v preprostem obarvanju

Obstaja več osnovnih barvil, ki jih je mogoče uporabiti v laboratoriju za mikrobiologijo. Najbolj uporabljeni so:

• Metilen modra.
• Kristalna vijolična.
• Malahit zelena.
• Osnovni fuchsin.

Vsa ta barvila dobro delujejo v bakterijah, ker imajo barvne ione (kromofore) s pozitivno obremenitvijo (kationsko).

Časi obarvanja za večino barv so razmeroma kratki. Na splošno se gibljejo od 30 sekund do 2 minuti, odvisno od afinitete barvila.

Pomembno je upoštevati, da ga je treba pred barvanjem vzorca s preprostim obarvanjem razširiti in pritrditi na stekleni list (diapozitiv). Razširjeni in fiksni vzorec se imenuje Smear.

Postopek

Korak 1

Drsnik položite na polico za obarvanje in nanesite želeno barvilo. Pustite ustrezen čas časa.

Običajno preprosto obarvanje traja nekaj sekund ali nekaj minut, odvisno od barve za barvanje.

Opazovanje

V tem koraku je pomembno, da ne presežete priporočenega časa za uporabljeno barvilo, saj bi se lahko kristali oblikovali v listu, kar ustvarja tisto, kar je znano kot "artefakti", ki izkrivljajo morfologijo celic.

2. korak

Previdno sperite razmaz drsnika z destilirano vodo iz steklenice ali z vodo iz pipe, ki teče počasi, dokler odtok ne postane prozoren. Na splošno traja 5 do 10 sekund.

Opazovanje

Ne nanesite vodnega toka neposredno na vonju, da preprečite silo iste škode.

Če ni destilirane vode, lahko brez težav uporabljate vodo iz pipe, saj ne bo vplivalo na rezultat obarvanja.

Korak 3

V enem smislu in brez drgnjenja drsnik posušite z vpojnimi papirnatimi brisačami. Prepričajte se, da je spodnji del diapozitiva čist.

4. korak

Opazujte razmaz, barvan v mikroskopu. Začnite z najbolj oddaljenimi cilji, da pravilno poiščete območje, ki ga želite podrobneje opazovati. Spremenite cilj, da se približate in še več vzorcu.

Opazovanje

Za uporabo cilja z največjim povečanjem (običajno 100x) potopnega olja je treba uporabiti, saj to pomaga svetlobi, da prodre bolje in da je slika videti bolj jasna. Uporaba ovitka ni potrebna.

5. korak

Končno zavrzite vse vzorce v ustrezni posodi, ki je ustrezno označena kot "biološko tveganje".

Prijave

• Opazovanje celične morfologije.
• Opazovanje vzorcev v kemičnih laboratorijih za določitev prisotnosti bakterij, virusov itd.
• Določite nalezljive zdravila in pravilno diagnosticirate.
• Kot nepogrešljivo orodje v mikrobiologiji.
• Vedeti, ali ima bakterija kapsulo ali ne, in veš, kakšna vrsta pripada.

Reference

1. Mikrobiološke aplikacije: laboratorijski priročnik v splošni mikrobiologiji. Podjetja McGraw-Hill.
2. Harisha, s. Uvod v praktično biotehnologijo. Medijski požarni zid.