Značilnosti, vrste, tehnike in histologija krvi

On Krvni razmaz Gre za razširjeno periferno kri, ki služi za analizo komponent, prisotnih v krvnem obtoku. Opazovanje krvnega drgnjenja.

Krvni odtrganje.

Priprava drgnjenja krvi. Vir: Kri v laboratorijskem kozarcu. Pub domene.mreža

V njem je mogoče zaznati nepravilnosti v številu celic, kot so: levkocitoza ali levkopenija, limfocitoza ali limfopenija, nevtrofilija ali nevtropenija, trombocitoza ali trombocitopenija in eozinofilija. Nenormalnosti lahko opazimo tudi v obliki in velikosti celic.

Poleg tega je mogoče zaznati različne vrste anemij, levkemije in bakterijskih ali krvnih zajedavcev.

Za to obstajajo različne vrste razmaza, ki se izvajajo glede na namen študije. Obstajajo tanke kapljice in debelo kapljico. Ti razmazi se razlikujejo v tehniki izvajanja in v namenu študije.

Fine kapljice se uporabljajo kot dopolnilo za dokončanje hematologije. To poleg analize oblike in morfologije treh celičnih serij, ki sestavljajo krvi: rdeča serija, bela serija in trombociti, zagotavlja tudi podatke o formuli levkocitov, poleg analize oblike in morfologije. Čeprav služijo tudi kot dopolnilo preučevanju debele kapljice.

Debela kapljica se uporablja za diagnozo bolezni, ki jih povzročajo hemoparaziti, kot so malarija ali malarija, toksoplazmoza, leishmaniaza, bolezen pira, babezioza in mikrofilarijaza.

[TOC]

Značilnosti krvnega razmaza

Dobro drgnjenje krvi mora ustrezati določenim lastnostim. Med njimi je mogoče omeniti:

-Vzorec mora izpolnjevati minimalne zahteve glede kakovosti, da so reprezentativne.

-Vzorčni prevzem je treba dobro izvesti.

-Pravočasna izvedba razmaza.

-Če se izvede z vensko krvjo, uporabite antikoagulant, ki ne deformira celic in premeša cev pred drgnjenjem.

-Če je to storjeno s kapilarno krvjo, zavrzite prvo kapljico.

-Podaljšani mora biti homogen. To zagotavlja, da se celice enakomerno porazdelijo in da je mogoče narediti dobro analizo krvnih celic glede na obliko in število.

-Strani razmaza morajo biti gladke od začetka do konca.

-Razmaz mora spoštovati mejo od 1 do 2 mm na straneh diapozitiva.

-Razširjena plast mora debelino postopoma zmanjšati od začetka do konca (fino kapljico z metodo diapozitiva).

-Mora biti pravilno označen, da se prepreči zmeda vzorčenja.

-Nastavite in pravilno barvajte za jasno opazovanje krvnih elementov.

-Preden se vozite s pripravo mikroskopa, naj se razmaže posuši. Namestitev potopnega olja na mokro drgnjenje.

Vrste razmaza v krvi

Periferni razmaz krvi lahko razvrstimo kot tanko kapljico in debelo kapljico. Fina plast se uporablja za preučevanje formule levkocitov in morfološkega opazovanja krvnih celic. Med drugim lahko med drugim opazimo tudi zunajcelične bakterije, kot so znotrajcelične poteze in hemoparaziti, kot je plazmodij.

V fini kapljici lahko prepoznate vrsto parazita, zato je bolj specifična tehnika kot debela kapljica, vendar je debela kapljica bolj občutljiva, saj gre za koncentracijsko tehniko, ki se uporablja za izčrpno iskanje zunajceličnih hemoparazitov.

Obstajata dve vrsti drobnega kapljic: tiste, ki so narejene v diapozitivih in tistih, ki so narejeni v platnicah. Tisti iz debelih kapljic se izvajajo na diapozitivu.

Tehnike vzorca krvi

Krvni razmazi lahko naredite iz kapilarne punkcije ali venskega vzorca z antikoagulantom. Če to storite iz krvi z antikoagulantom, lahko vonj pripravite do 2 uri po odvzemu vzorca.

Previdnost uporabe antikoagulantov, ki ne definirajo krvnih celic. Najboljša možnost je EDTA. Nasprotno se je treba izogibati uporabi antikoagulantov, kot je trisodni citrat.

Vam lahko služi: SIM Medium: Temelj, priprava in uporaba

Če vzorec vzame kapilarno punkcijo, je treba podaljšek vonja takoj izvesti, preden je kri ukrivljena.

Prva kapljica mora biti zavržena. To je najbolj priporočljiva tehnika za opazovanje celične morfologije, saj kri nima dodatka.

Za opazovanje hemoparazitov so Solari in sodelavci v svojem raziskovalnem delu sklenili, da sta obe tehniki (venopunkcija in kapilarna) enako učinkovita.

Vzorce vzorca krvi: a. Kapilarna punktura. B. Venska punkcija. Vir: a. Flickr.com b. Pxhere.com

Tehnike za izdelavo krvnega razmaza

Krvni odtrganje. Možno je tudi z avtomatizirano opremo.

-Drgnjenje v diapozitive

Večina laboratorijev je najprimernejša tehnika za njihovo enostavno manipulacijo.

S pasterjevo pipeto kapljica krvi ni zelo debela ali preveč fina na sredini enega od koncev čistega diapozitiva.

S pomočjo drugega diapozitiva z zamrznjenim koncem je vonj narejen. Zmrznjeni diapozitiv je nameščen pravokotno na nasprotnem koncu, kjer se nahaja kapljica.

Nagnjen je, da tvori kot med 30 - 45 ° in drsi proti kapljici; Ko se ga dotika, se linearno širi na robu zmrznjenega diapozitiva in se s konstantnim in definiranim gibanjem vrne list; Preden dosežete konec, se drsnik dvigne.

Na ta način se na površini držala za sprejem iztegne homogena plast.

Razmaz se pusti, da se posuši. Potem je pritrjen in obarvan z po možnosti obarvano. Pred opazovanjem mikroskopa se pusti, da se posuši. Kapljica olja se postavi na razširjeni obraz in ga opazimo na optični mikroskop.

Krvni razmaz v diapozitivu. Zgornja slika: razmažite brez barvila. Spodnja slika: barvana razmaza. Vir: Coinmac [CC BY-SA 3.0 (https: // creativeCommons.Org/licence/by-sa/3.0)]

Deli razmaza, narejene na diapozitivu

Pri tej vrsti razmaza lahko ločimo tri določena območja: glava, telo in rep. Glava ustreza območju, kjer se začne razmaz, je najlepše območje in ni dobro opazovati.

Telo je osrednji ali vmesni del drgnjenja.

Rep ustreza končnemu delu razmaza; Tukaj porazdelitev ni več enakomerna in ponavadi izgubi morfologijo eritrocitov.

Nadzor kakovosti v tehniki imetnika

V tej tehniki igra temeljno vlogo:

-Čiščenje in razmaščevanje diapozitiva: zagotavlja dobro drsenje vzorca.

-Velikost kapljice: z zelo velikimi kapljicami bo pridobljena debelejša in debelejša, z zelo majhno padco bo podaljšana in bolj izjemno fina.

-Hitrost, ki se nanaša na podaljšek: pri manjši hitrosti bo vonj lepši, z večjo hitrostjo bo to debelejša.

-Kot izvedbe: pod nižjim kotom bo lepši vonj, pod najvišjim kotom bo debelejši.

-Drgnjenje v platnicah

Se ne uporablja za to, da bi bili vpenjali.

Na sredini pokrova je nameščena ne zelo debela kapljica. Takoj je na tem način postavljen še en ovitek, da so nasveti obeh naslovnic, ki tvorijo zvezdo.

Kapljica se bo spontano razširila na površini obeh platnic. Ko je podaljšek dokončan, vsaka laminilla drsi na nasprotni strani drug drugega (ena na desni in drugi v levi).

Tehnika zagotavlja dva razmaza namesto enega.

Vam lahko služi: prednosti in slabosti spolne reprodukcije

Nameščeni so, da se posušijo z obrazom podaljšanega navzgor. Ko se posuši, je pritrjen in obarvan s tehniko preferenc. Dovoljeno se posušiti. Kapljica potopnega olja je nameščena v diapozitivu, drgnjenje je nameščeno z obrazom iztegnjenega navzdol in ga opazimo v mikroskopu.

Nadzor kakovosti v tehniki CupBject

Pomembno je pridobiti dober razmaz za to tehniko:

-Čiščenje pokrovov (pomaga pri dobrem drsenju vzorca).

-Velikost kapljice (vpliva na debelino iztegnjenega).

-Hitrost, s katero so pokrovi ločeni (vpliva na homogenost razširjenega).

-Z avtomatizirano opremo

Lahko jih storijo prek katere koli od teh ekip: spinner in avtoslide.

Spinner je sestavljen iz namestitve diapozitiva s kapljico krvi na posebno centrifugiranje posode. Vzorec se centrifugira pri visokih hitrostih; Na ta način nastane podaljšana homogena in globa vzorca. Njegova pomanjkljivost ima možnost pokazati hemolizo.

Autoslide je instrument, ki mehansko izvaja premike za izvedbo razmaza v diapozitivih. Prav tako lahko popravite in barvate razmaz. Se lahko celo prilagodi nekaterim avtomatskim hematološkim števcem.

Debela tehnika razmaza

Za iskanje hemoparazitov je priporočljivo narediti dva razmaza: eno s fino kapljico in eno z debelo kapljico.

Naredite kapilarno punkcijo, očistite prvo kapljico. Na diapozitiv postavite lepo kapljico in izvedite vonj, kot je bilo že razloženo. Za debelo kapljico postavite veliko kapljico na drug diapozitiv in se raztezajte v obliki 1,55 mm kvadrata. Naj oba razmažeta.

Obarvanje

Za tiste s finimi kapljicami lahko med drugim uporabite obarvanje Giemsa ali Wright. Za debelo kapljico je priporočljivo obarvanje Giemsa ali May-Grunwald Giemsa.

Giemsa obarvanje

Razmaz se pritrdi 3 minute z metanolom, odcedi se in pusti, da se spet posuši. Potem je razmaz pokrit z obarvanjem Giemsa 10-15 minut. Operite z destilirano vodo in pustite, da se posuši. Za opazovanje kapljice potopnega olja na mikroskopu.

Wright obarvanje

Razmaz je pokrit z Wrightovim barvilom 5 minut. Zavrzite in postavite pufersko raztopino pri pH 6, 8 za 6 minut. Odpihnite se na homogenizacijo. Operite z destilirano vodo in pustite, da se posuši. Upoštevajte mikroskop.

Vrste pomanjkljivega razmaza

Pojavlja se pri vajencih v tehniki finega padca z diapozitivi.

Razmazajte z območji različnih debeline (fino in debelo prepleteno)

To je zato, ker izvedeno gibanje ni bilo konstantno med podaljšanim, kar se ustavi in ​​ponastavi.

Razmazajte z zelo kratkim podaljšanim

Imata dva vzroka: eden je posledica dejstva, da je bil zmrznjen diapozitiv dvignjen, preden dosežete drugi konec lista. V tem primeru je izjemno debel in kratek.

Po drugi strani pa, če je razmaz kratek, a tanek, je to zato, ker je bila velikost kapljice zelo majhna.

Drg

Predstavlja je več vzrokov: eden je, da je zamrznjena pesem pokvarjena, da se pritisk na sprejemnem diapozitivu poveča v času dokončanja podaljšanega ali da se zmrznjena pesem diapozitiva porabi.

Drg

So posledica uporabe maščobnega razmaza (slabo oprane in razmaščene).

Zelo debel ali zelo lep razmaz

Kapljice prevelike bodo od začetka do konca ustvarile zelo debel vonj in zelo majhne kapljice zelo fine razmaze.

Histologija

V krvnem razmazu lahko vidite krvne celice. Med njimi so:

-Eritrociti ali rdeče krvne celice

Človeška kri, eritrociti ali rdeče krvne celice in dve beli krvni celici. Vzeti in urejen od: Viascos [cc by-sa 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licence/by-sa/4.0)].Vaše opazovanje je izrednega pomena. Na tej ravni je mogoče zaznati težave anemije, talasemije, bolezni kostnega mozga itd.

Število eritrocitov ali rdečih krvnih celic je približno 5 x 10⁶ MM3 v človeku in 4,5 x 10⁶ Pri ženskah. Rdeče krvne celice so oblikovane kot bicontični diski, s fiziološko osrednjo berzijo. Opazujemo jih ločeno (normalno) ali oblikovanje zlaganja v Rouleauxu (nenormalno).

Vam lahko služi: trehalosa: značilnosti, struktura, funkcije

V razmazih je prisotnost poikilocitoze (eritrociti različnih oblik), anizocitoza (eritrociti različnih velikosti), anizopoikvilocitoza (različne oblike in velikosti), anisocita (različne barve) (mamili), mikrocitoze (Omamnerocite) ) in makrociti (večji eritrociti).

Ko imajo pomanjkljivost količine hemoglobina in osrednje bernice, se poveča, se reče, da obstaja hipotrik. Ko opazimo normalno rdečo serijo, bo to poročalo kot normocitno in normokromsko.

-Beli ali levkociti

bele krvničke

Običajna količina se giblje od 5.000 do 10.000 mm³. Spremenjeni so v nalezljivih procesih, v alergijah in v levkemiji. V krvnem razmazu je mogoče spodaj razložiti več vrst, razloženih spodaj.

Segmentirani nevtrofili

Predstavljajo 55-65% vseh levkocitov. Merijo med 10-15 μm. Imajo segmentirano ali lobeto jedro, ki sprejema različne morfologije, zato se imenuje polimorfonuklearno.

V svoji citoplazmi imajo obilno nevtrofilnih zrnc in nekaj azurofilcev. Povečajo bakterijske okužbe (nevtrofilija), zmanjšanje virusnih okužb (nevtropenija).

Opazimo morfološke anomalije, kot so pleokariocitoza (hipersegmentirano jedro), padle (nezrele celice) ali makropolitos (ovalna in velika velikost).

Druge spremembe:

-Strupene granulacije

-Pseudo Pelger nevtrofili (jedro ne predstavlja lobulacij ali so bilobulirane).

-Telesa Döhle: temno modra citoplazemska vključki.

-Povečana citoplazemska bazofilija.

-Intracitoplazemske vakuole.

-Celična piknoza (izguba mednarodnih mostov).

Segmentirani eozinofili

Predstavljajo 1-3% vseh belih krvnih celic. Merijo 9-10 μm. Za njih je značilna prisotnost obilnih acidofilnih citoplazemskih zrnc in malo azurofila. Njegovo jedro ima dve lobulaciji. Njegovo število se poveča pri alergijah in bolezni parazitskega izvora.

Segmentirani bazofili

So izredno malo, predstavljajo 0-1% levkocitov. Izmerijo 10-12 μm. Jedro je običajno nepravilni robovi in ​​ga je mogoče bilobe. Zelo redko je mogoče opaziti bazofilijo.

Limfociti

So majhne celice z bazofilno citoplazmo, z jedrom, dobro definirano, okrogle, s kondenziranim kromatinom. Jedro pokriva skoraj celotno celico. Predstavljajo 26-40% krvnih levkocitov. Povečajo virusne okužbe (limfocitoza). Lahko opazimo reaktivne limfocite.

Monociti

Večje celice kot limfociti, z večjo citoplazmo in ovalno jedro kromatina ter LAX. Izmerijo 9-12 μm. Citoplazma je obilna in jo običajno vidimo v bledo sivkasto modri barvi z običajnimi tehnikami barvanja. Med spremembami lahko opazimo vakuulirane in monocitoze monocite.

-Trombociti

Merijo med 1.5-3 μm. Njegova oblika je okrogla ali ovalna. Običajna vrednost se giblje od 150.000 do 350.000 trombocitov/mm3. Lahko zmanjšajo nekatere virusne okužbe. Nimajo jedra in barvne vijolične. V tej seriji lahko opazimo nepravilnosti, kot so makroplaketi ali mikroplaki, trombocitoza ali trombocitopenija in fragmenti trombocitov.

Patološki elementi

Hematični paraziti

V krvnem razmazu lahko opazimo hemoparaziti, kot je vzročno sredstvo malarije (paraziti rodu plazmodije). Zato je pomembno, da se razmaza analizira ročno, saj avtomatizirane ekipe to ugotovitev ostanejo neopažene.

Bakterije

V patologijah, kot sta ponavljajoča se vročina ali pri Lymejevi bolezni, je mogoče opazovati vaše vzročno sredstvo. V tem primeru ustreza spirohetom Borrelia Recurrenti Še Borrelia Burgdorferi V krvnem razmazu.

Nezrele celice

V levkemiji, levkemoidnih reakcijah in pri leucoeritroblastični reakciji opazimo hude primere, med drugim opazimo hude primere. Pri bakterijskih okužbah lahko na levi strani lahko rahla odstopanja (prisotnost kajado). Tudi v nekaterih anemijih lahko opazujete eritroblaste.

Reference

1. Krvno in hematopoetsko tkivo. Na voljo na: SLD.Cu
2. Gomez A, Casas M. 2014. Angel. Klinična razlaga laboratorija. 8. izdaja. Pan -american Medical uredništvo.
3. Solari Soto L, Soto Tarazona A, Mendoza Requena D, llanos računi za. Primerjava parazitskih gostot v grobi venski krvni protin proti digitopunciónu pri diagnozi malarije vivax. Rev Med Hereed 2002; 13 (4): 140-143. Na voljo na: Scielo.org.
4. Terry Leonard Nelson, Mendoza Hernández Carlos. Pomen preučevanja razmaza periferne krvi pri starejših. Medisur 2017; 15 (3): 362-382. Na voljo na: Scielo.Sld
5.  Grinspan s. Študija razmaza periferne krvi. Neprekinjeno medicinsko izobraževanje. Na voljo na: BVS.Hn/rmh