Selenito juha, kaj je, temelj, priprava, uporablja

On Selenito juha Je selektivni medij za tekočino. Zasnoval ga je Leifson za obogatitev vzorcev, kjer obstaja prisotnost enteropatogenih bakterij rodu Salmonella.

Ta mediji izpolnjujejo zahteve Ameriškega združenja za javno zdravje (APHA), zato je sprejet za preiskavo prisotnosti Salmonela v vzorcih blata, urina, tekočine ali trdne hrane, vode.

Selenito juha. Vir: Fotografija avtorja MSC. Marielsa Gil

Kemična sestava, ki jo ima naklonjena okrevanju teh mikroorganizmov, in posledično zavira rast drugih. V glavnem je strupen za večino bakterij, ki pripadajo družini Enterobacteriae. Vendar pa omogoča tudi okrevanje sevov Shigella in ne zavira rasti Pseudomonas in Proteusa.

Sestavljen je iz brezvodnega natrijevega vodika Selen, brezvodnega natrijevega fosfata, peptona in laktoze. Obstaja tudi različica, ki ji je dodana Cistina, od tod tudi njeno ime Selenito-cistina juha.

Trenutno je zaželena uporaba selenito-cistirane juhe, saj je dosežen večji odstotek obnovitve salmonele, enakovrednega tistemu, ki ga opazimo z drugimi selektivnimi sredstvi z istim namenom, na primer juha natrijevega tetracije.

Osnova

Peptoni, ki jih vsebuje juha, služijo kot hranila za dober razvoj mikroorganizmov. Salmonella sevi uporabljajo peptone kot vir dušika, vitaminov in aminokislin.

Laktoza je fermentacija ogljikovih hidratov, natrijeva selenit. Natrijev fosfat je amortiber, ki stabilizira srednji pH.

Vam lahko služi: kemiosteat: značilnosti, zgodovina in uporaba

V primeru variante juhe Selenito, ki vsebuje L-cistina.

Priprava

-Selenito juha

Če imate komponente mešanice, lahko tehtate:

4 gr brezvodne natrijeve vodika.

10 gr brezvodnega natrijevega fosfata.

5 gr peptonov.

4 gr laktoze.

Spojine raztopite v 1 liter sterilne destilirane vode. Lahko ga je rahlo segreti, da se raztopi v celoti.

Nekateri laboratoriji izpostavljajo medij 10 minut v tekoči pari, da ga sterilizirajo, saj avtoklava ne bi smeli uporabljati. Če je medij steriliziran, ga lahko shranite v hladilniku do njegove uporabe.

Pripravimo ga lahko tudi brez sterilizacije in serviranja od 10 do 15 ml do sterilnih epruvetov.

V tem primeru morate takoj stati in uporabiti. Ker medij ni sterilni, ga ni mogoče shraniti v hladilniku za kasnejšo uporabo.

-Priprava komercialnih medijev

Če je na voljo komercialni medij, 23 gr dehidriranega medija in raztopljenega v litru sterilne destilirane vode. Na kratko segrejte, da se konča raztapljanje. Ne sterilizirajte v avtoklavi. Aseptično servisira 10 ali 15 ml v sterilnih epruvetah.

Končni pH medija mora biti 7,0 ± 0,2.

Treba je opozoriti, da je barva dehidriranega medija bež in priprava je jasna in prosojna jantarna.

Varianta selenito-cistirane juhe

Vsebuje enake spojine selenitne juhe, vendar se doda 10 mg cistine. Preostali postopek je popolnoma enak, kot je opisano zgoraj.

Vam lahko služi: parafiletična skupina

Prijave

Ta medij je poseben, ki ga je treba uporabiti v epidemioloških študijah, v primerih, ko bolezen ni v akutni fazi, asimptomatskih bolnikov ali zdravih nosilcev.

Izolacija spolne salmonele je običajno težka, saj vzorce običajno na kratko onesnažujejo. Biti v matici.

Po drugi strani so surovina, s katero se pogosto pripravljajo predelana hrana.

Zato se salmonele, prisotne v surovini. Prav tako so lahko pri kliničnih vzorcih, kot so blato, sevi lahko šibki, če prihajajo od bolnikov, ki so bili zdravljeni z antibiotiki.

Zato mora vsak vzorec sumi na prisotnost salmonele v juhi Lactosado in nato obogatiti v juhi Selenito, da se optimizira njegovo okrevanje v selektivnih medijih, kot so SS agar, Xilosa agar, de -kisikolat lizin (XLD) , Hoktoen Enter (He) in Green Apar -Brillante, med drugim.

Posejan

Za vzorce blata vzemite 1 gr vzorca in suspendirajte v cevi z 10 do 15 ml juhe Selenito. Če so iztrebki tekoči, vzemite 1 ml in suspendirajte v juhi. Za rektalne brise prenesite material brisa v juho.

V vzorcih trdne hrane vzemite 1 gr in suspendiraj v juhi Selenito.

V tekoči hrani mešajte v enakih delih z juho dvojne koncentracije selenita.

Vam lahko služi: halucigenia

Za vzorce urina morate centrifugirati, zavreči supernatant, vzeti vso usedlin in ga suspendirati v juhi Selenito.

Juhe pri 37 ° C inkubirajo 24 ur inkubacije. Rast bakterij dokazuje motnost. Za inkubiranje 42 ° C je mogoče vključiti tudi dodatno cev na vzorec. Kasneje posejajte selektivne trdne medije iz juhe Selenito.

QA

Za nadzor sterilnosti se 37 ° C inkubira 24 ur, selenito juha vsakega sklopa brez inokuliranja. Pričakuje se, da ni motnosti, nobene spremembe srednje barve.

Za nadzor pravilnega delovanja medija se lahko uporabijo znani sevi, kot so:

Salmonella Enteritidis ATCC 13076, Salmonella tiphimurium ATCC 14028,  Salmonella choleraesuis ATCC 12011, Escherichia coli ATCC 25922 in Proteus mirabilis ATCC 43071.

Pričakovani rezultati so:

• Za prve tri bakterijske seve mora biti rast zadovoljiva.
• Za Escherichia coli Delna inhibicija.
• Za zmerno rast Proteusa.

Omejitve

Juha na pol -selenito je strupena za človeško kožo, zato se je treba izogibati neposrednemu stiku.

Reference

1. Britanski laboratoriji. Selenito juha. Na voljo na: Britanaalab.com
2. Neogen laboratoriji. Selenito juha. Na voljo na: FoodSafety.Neogen.com