Laktosado juha

Laktanirane juhe močno. Vir: Fotografija avtorja MSC. Marielsa Gil

Kaj je juha Lactosado?

On Laktosado juha To je tekoča kultura, ki ni selektivna, v glavnem se uporablja kot sredstvo za predhodno bogastvo pri izolaciji sevov Salmonela, iz mikrobiološke analize, ki jo je naredila predelana hrana, mlečne izdelke ali vode. To priporoča Mednarodna komisija za mikrobiološke specifikacije za hrano (ICMPF).

Medij vsebuje ekstrakt encimskega želatina, mesa in laktoze, ki so potrebne za rast bakterij. Poleg tega je laktoza fermentacijski ogljikovi hidrat, zato ga nekateri koliformi lahko razgrnejo s proizvodnjo plina.

Zato juho Lactosado priporoča Ameriško združenje za javno zdravje (APHA) za domnevno študijo skupnih in fekalnih koliformnih bakterij. Opisana je kot odlična alternativa za zamenjavo juhe lauril sulfat v standardni tehniki najverjetnejšega števila (NMP), ki se uporablja za mikrobiološko analizo vzorcev hrane, mlečnih in površinskih voda, podzemnih, rekreacijskih, domačih in industrijskih ostankov.

Osnova

Za mikrobiološko analizo nekaterih vzorcev je prehod predprikritja bistvenega. 

Takšen je primer suhe in predelane hrane, morda onesnažena z Salmonellas sp. V teh primerih, če so bakterije prisotne, so med postopkom proizvodnje izdelka utrpele fizično in kemično zlorabo.

Na tak način, da so mikroorganizmi izpostavljeni neželenim dejavnikom, kot so dehidracija, izpostavljenost zaviralnim ali strupenim produktom, in prekrivanje, ki ga ustvarjajo prisotnost drugih bakterij v večji količini, med drugim.

V tem smislu ima juha Lactosado popravilo poškodovanih struktur mikroorganizma, zaradi česar se je okrevala in razmnožila tako, da jo je mogoče zaznati.

Prav tako ima laktosado juha zmožnost razredčitve zaviralnih snovi, ki lahko vplivajo na njegovo sposobnost, kar omogoča njegov razvoj. Poleg tega je prehranska sestava mlečne juhe strateška Salmonella sp nad drugimi mikroorganizmi.

Vam lahko služi: paleobiologija: zgodovina, specialitete, odkritja

Za končno identifikacijo mora biti subkulturno do drugih dokončnih kultur.

Po drugi strani sestava medija omogoča tudi odkrivanje laktoznih fermentacijskih mikroorganizmov, ki proizvajajo plin.

Priprava

Za pripravo litra laktozne juhe je treba tehtati in raztopiti 13 gramov dehidriranega medija.000 ml destilirane vode.

Če želite pomagati raztapljanju medija v vodi, lahko raztopino nekoliko ogrejete, vendar ne preveč.

Ko je homogena, raztopina pripravi na naslednji način: Če bo juha uporabljena za iskanje koliform, se pripravi šok z epruvetnimi cevmi.

Durhamova cev je zelo pomembna podrobnost, saj bo omogočila oblikovanje plina, podatki z veliko vrednostjo pri iskanju koliform.

Pripravili so cevi, v njih je razporejenih 10 ml juhe Lactosado, količina, ki mora zadostovati za pokritje celotne cevi Durham.

Če bo juha Lactosado uporabljena kot juha pred Enriko, ni treba namestiti fermentacijske cevi Durham. V tem primeru je potrebnih več srednjih (225 ml), ki bo postrežena v 500 ml kozarcih, širokih ustih in s toplotno odporno prevleko.

Nato se cevi ali steklenice odpeljejo v avtoklav pri 121 ° C 15 minut.

Medij mora biti na končnem pH od 6.9 ± 0.2 do 25 ° C.

Juhe so shranjene v hladilniku do uporabe. Preden jih uporabimo, se morajo ublažiti pri sobni temperaturi.

Po drugi strani pa lahko pripravimo tudi juho Lactosado pri dvojni koncentraciji.

Vam lahko služi: herpetologija: zgodovina, zbirke, funkcija herpetologa

Nekateri laboratoriji dodajo brome. V tem primeru juha vzame vijolično barvo in če pride do fermentacijskih sprememb v rumeno.

Prijave

V mikrobioloških laboratorijih se juha Lactosado pogosto uporablja, ker gre za razmeroma gospodarski medij, ki ponuja zanesljive in hitre rezultate (24-48 ur).

Uporablja se lahko za analizo skupnih in fekalnih koliform v vodi in hrani ali kot pred Enrique juha za Salmonela.

Predsedujoča

Prednastavitev je korak pred obogatitvijo vzorca, kar močno izboljša okrevanje spolnih bakterij Salmonela V predelani hrani.

Če želite to narediti, se vzorec trdne hrane (25 gramov) ali tekočine (25 ml) posejemo v 225 ml juhe Lactosado in inkubiramo 24 do 48 ur. Nato bo subkulturni v mediju, obogatenem kot selenito juha cistina ali tetracijska juha. Nato pojdite na selektivne medije XLD in SS.

Analiza skupne in fekalne koliforme

Je odličen medij kot indikator fekalne kontaminacije.

Zato je juha Lactosado idealna za domnevno fazo študije koliform po najverjetnejši metodi števila.

Za vzorce, v katerih se sumi na veliko število koliform, bo inokulirana nižja količina iste (1 ml), medtem ko je za vzorce, v katerih se sumi manj koliform, več prostornine vzorčenja (10 ml).

Za analizo je narejenih 10^-1, 10^-2, 10^-3, tvori 3-5 cevi za vsako uporabljeno koncentracijo.

Iz vsakega redčenja je enak volumen posejan v juhe laktosada.

Cevi inkubiramo 24 ur. Juhe, ki so negativne, se inkubirajo za 24 ur več.

Lahko vam služi: favna in flora perujskega morja

Interpretacija rezultatov poteka z opazovanjem dveh značilnosti: prva je prisotnost ali odsotnost motnosti, in ker ta medij ne vsebuje indikatorja pH.

Drugi je proizvodnja plina. Plin se zlahka dokaže v cevi Durham, z videzom enega ali več zračnih mehurčkov v notranjosti.

Šteje se za pozitivno, če opazimo obe značilnosti, to je motnost s proizvodnjo plina. Pozitivne cevi je treba zavrniti v potrditvenih medijih (2% svetle žolčne zelene juhe in EC juha).

Srednji nadzor kakovosti

• Pri pripravi medija je pomembno, da ne pozabite postaviti Durhams cevi, če je namen istega študija koliform.
• Pred sterilizacijo ne pregrejte medija.
• Distribuirati v epruvetah pred sterilizacijo, nikoli po.
• Ne uporabljajte, če ima medij več kot 3 mesece pripravljen.
• Ne uporabljajte, če opazimo kakšno spremembo običajnih značilnosti medija.
• Ko pripravljate serijo juhe laktosado, morate dokazati kakovost istih sejalnih sevov, znanih kot Escherichia coli, Enterobacter aerogenes, Citrobacter freundii in Klebsiella pneumoniae. Zelo dobro rastejo, s proizvodnjo plina (pozitiven nadzor).
• Lahko vključuje tudi Pseudomonas aeruginosa, Salmonela Tifimurium tudi Enterococcus faecalis, Dobro rastejo, vendar brez proizvodnje plina (negativni nadzor).
• Mora biti v čakanju, da je prvotna barva dehidriranega medija bež in barvo zelo jasnega in prozornega rumenega medija. Če opazimo spremembo barve ali videza, lahko pride do poslabšanja.

Reference

1. Acevedo r., Severiche, c., Castillo, m. Okoljska biologija in mikrobiologija. Univerza v Cartageni, Kolumbija.
2. Conda Laboratories. Dvojna koncentracija laktozne juhe (evropska Pharm).