Czapek Head, priprava, uporabe in omejitve

On Czapek agar (CZA) je selektivni medij za trdno kulturo, posebej zasnovan za gojenje bakterij in gliv saprofitov. Ustvaril ga je botanik Friedrich Johann Franz Czapek iz poljskega izvora in ameriški kemik Arthur Wayland Dox; Zato je ta agar znan tudi kot Czapek-Dox Half.

Prvotni medij je bil tekoč, a pozneje je bil dodan agar za trden medij. Czapek medij je sestavljen iz natrijevega nitrata, bipotaznega fosfata, magnezijevega sulfata, kalijevega klorida, železovega sulfata, saharoze, agar in destilirane vode.

Czapek a. Aspergillus paraziticus b. Vir Aspergillus fumigatus: a. Medmyco [cc by-sa 4.0 (https: // creativeCommons.Org/licence/by-sa/4.0)]/ b. Foto: Dr. David Midgley. Wikipedija.com

Agar czapeka je 7.3, vendar obstaja varianta, ki ji je dodana 10% mlečna kislina, katere pH je 3,5. Ta kisli medij se uporablja za gojenje acidofilnih mikroorganizmov.

Po drugi strani so nekatere komercialne hiše spremenile sestavo czapekovega agarja s spreminjanjem magnezijevega sulfata in bipotazičnega fosfata z gliceofosfatom; Ta sprememba preprečuje oborino magnezijevega fosfata, opaženega s konvencionalno formulo. Prav tako obstaja še ena različica, ki ji je dodan ekstrakt kvasa.

Nazadnje Czapek Agar priporoča Ameriško združenje za javno zdravje APHA za preučevanje Actinomycetes sp, Aspergillus sp, Paecilomyces sp in Penicillium sp. Za te vrste so značilni okoljski mikroorganizmi in oportunistični patogeni.

[TOC]

Osnova

Ta medij vsebuje saharozo; Ta ogljikovi hidrat služi kot vir ogljika, natrijev nitrat.

Zaradi tega se Czapek medij šteje za selektivno, saj lahko razvije le mikroorganizme, ki lahko uporabljajo anorganske spojine kot edini vir dušika.

Kot regulativna snov srednje osmolarnosti je bipotazični fosfat. Po drugi strani magnezijev sulfat, kalijev klorid in železov sulfat zagotavljajo bistvene minerale za rast mikroorganizmov saprofitov (svobodno življenje). S to formulo nastane oborina magnezijevega fosfata.

Lahko vam služi: AGAR Standard Račun: fundacija, priprava in uporabe

Nazadnje je dodajanje agarja spojina, ki zagotavlja trdno konsistenco okolju, voda pa je topilo vseh komponent.

Pri spremenjeni formuli Czapeka agarja ni tvorjenja oborine in izboljša rast rasti nekaterih gliv.

Ekstremna kislost kislega agarja Czapeka naredi to bolj selektivno sredstvo, kar omogoča le rast acidofilnih mikroorganizmov, ki lahko uporabijo anorganski dušik. Medtem ko Czapek-Levadura Agar izboljšuje delovanje nekaterih gliv.

Priprava

Napol Czapek-Dox

Tehtamo 49 gr dehidrirane kulture in se raztopi v destilirani vodi. Nanesite toploto, da zavre. Mešanico pogosto pretresite, dokler se popolnoma ne raztopi.

-Czapek agar

Zmes, raztopljeno v epruvete. Ko odstranite iz avtoklava, homogenizirajo pred spanjem in pustite, da se strdi.

-Czapek agar plošče

Avtoklavacijo zmes, raztopljene pri 121 ° C 15 minut in ko pustite, da se ohladi pri 50 ° C, homogenizacija in vlivanje 20 ml v sterilni petri. Do uporabe naj se strdi, investira in prihrani v hladilnik.

PH mora biti 7,3 ± 0,2. Barva dehidriranega medija je bela, pripravljena.

Pol czapek pH kislina

Pripravite, kot je opisano, vendar dodajanje 10 ml sterilne sterilne kisline 10% za vsak liter pripravljenega medija. Spremenjeni Czapek medij mora biti pri pH 3,5 ± 0,2.

Napol spremenjen Czapek

Tehtamo 45,4 gr dehidriranega medija in se raztopi v 1 liter vode. Preostali del priprave je enak zgoraj opisanemu. Barva dehidriranega medija je bela in pripravljena je belkasta barva. Končni pH medija je 6,8 ± 0,2.

Lahko vam služi: vimentin: značilnosti, struktura, funkcije in uporabe

Napol Czapek-Levadura

Imenuje se tudi Czapek-Extract of Kvas (CYA). Vsebuje elemente klasičnega izvlečka kvasa Czapek Agar plus.

Uporaba

Czapek medij se med drugim uporablja za iskanje mikroorganizmov saprofitov v vzorcih tal, zelenjavi, zrnih, zraku, žuželkah.

Czapek A kisli agar se uporablja za rast acidofilnih mikroorganizmov, medtem ko je modificirani czapek agar še posebej uporaben za nastajanje Clamidospore pri zapletenih vrstah Candida albicans.

Končno je agar Czapek -Levadura zelo koristen za izolacijo Aspergillus in Penicillium.

Posejan

-Czapek agar

Če želite poiskati aktinomicete na tleh, nadaljujte tako, kot sledi: vzorec z vodo, fenolizirano s 30 minutami. Inkubira pri 28 ° C 5 do 7 dni.

Za zelenjave, zrnje in žuželke so nameščeni neposredno na agar. Tudi redčenje je mogoče narediti in sejati 0,1 ml na površini agarja.

-Spremenjen czapek agar

Za posejano ravno roko ali iglo je prežeta z brisom in inokulira zajemalko. 24 ur inkubirajte pri 28 ° C in pregledujte z mikroskopom nad in pod ploščo, da opazujete, ali so se oblikovale Clamidospore.

Inkubacijska temperatura in čas

Čas temperature in inkubacije se razlikujeta glede na vrsto mikroorganizma, ki ga je treba izolirati. Običajno plošče inkubiramo za en do dva tedna v temperaturnem območju od 20 do 25 ° C.

Vendar obstajajo posebni pogoji za nekatere seve. Na primer, večina vrst rodu Aspergillus ima optimalno rast pri 30 ° C; Vendar Do. fumigatus raste pri 50 ° C.

Kar zadeva čas inkubacije, je en ali dva tedna normalen Candida albicans Se lahko razvije v 24 do 48 urah pri 25 ° C.

Vam lahko služi: lipogeneza: značilnosti, funkcije in reakcije

Značilnosti nekaterih kolonij v tem mediju

-Penicillium atravenetum

Poteka v 12 dneh inkubacije pri 27 ° C. Njene kolonije so majhne (25 mm).

Kolonije so videti hitro, z belim definiranim robom in v središču predstavlja zelenkast modri ton, ki se strinja. Na hrbtni strani kolonije je oranžna, na sredini iste barve s pigmentno proizvodnjo.

-Aspergillus niger

Razvija se z belo in rumeno micelijem in črnimi sporami.

-Candida albicans

Kremne bež lahke kolonije se razvijejo. V obliki modificirane oblike agar agarja.

-Aspergillus paraziticus

Temno zeleni micelij se razvije v 7 dneh pri 25 ° C.

QA

Za oceno kakovosti kulturnega medija se lahko posejejo certificirani kontrolni sevi, kot so: Aspergillus niger MKTA 16404, Candida albicans MKTA 10231.

Aspergillus niger V približno 5 dneh razvije belo do rumeno in črno spore, medtem ko Candida albicans V 24 urah inkubacije bo imela zadovoljivo rast pri 25 ° C; Kolonije so kremna barva.

Omejitve

Nekatere študije so pokazale, da je za okrevanje aktinomicetov agar z najboljšo zmogljivostjo agar papeža dekstroze, ki je Czapek agar pustil na drugem mestu, toda za okrevanje Aspergillus in Penicillium Czapek agar je tisti, ki zagotavlja največje okrevanje oceniti.

Reference

1. Dávila M in sod. Antagonistični aktinomiceti proti fitopatogenim glivam kmetijskega pomena. Rev. Mex. znanost. Kmetijstvo 2013, 4 (8): 1187-1196. Na voljo na: Scielo.org.
2. Luna M, Lozada in, pšenica. Izolacija sevov Aspergillus niger, Ocratoxin A Producenti v shranjeni kavarni Verde (Arabica Coffea). Rev. Mex. Mikrofon . 2010; 32: 63–68. Na voljo v.Scielo.org.
3. Sodelavci Wikipedije. Czapek Medum. Wikipedia, brezplačna enciklopedija. 13. januar 2019, 20:30 UTC. Na voljo na: IN.Wikipedija.org
4. Conda Laboratories. Spremenjen agar czapek-dox. Na voljo na: Condalab.com
5. Mediji za gojenje mikrokitov. Agar Czapek-Dox. Pobožno v: medijski kultivni.com