Oprijete agar

Corynebacterium stratum na sklepnem agarju. Vir: Nathan Reading iz Halesowen, Velika Britanija, CC do 2.0, Wikimedia Commons

Kaj je scepljeni agar?

On Oprijete agar (Cistin-laktoza-elektrolita-pomanjkljiv) je diferencialna trdna kultura, ki se uporablja za diagnozo okužb sečil. Sestava kulturnega medija je zasnovana za dobro rast urinskih patogenov in je idealna za količinsko določitev enot, ki tvorijo debelo črevo (UFC).

Medij, ki je oprijet, ni selektiven, saj lahko v njem rastejo gram -negativni in gram -pozitivni mikroorganizmi. Toda to ni problem, saj večina urinskih okužb povzroči ena sama vrsta mikroorganizma.

V primeru polimikrobnih okužb je mogoče doseči 2 ali 3 različne bakterije, vendar je zelo redko in večino časa so kontaminirani vzorci.

Med gram -negativnimi bakterijami, ki lahko rastejo v tem mediju, so bacili, ki pripadajo družini Enterobacteriaceae in drugih enteričnih bacilih, ki so najpogosteje izolirani uroopatogeni v vzorcih urina naslednje: Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Proteus mirabilis, Morganella Morganii, Pseudomonas aeruginosa, med ostalimi.

Tudi med gram -pozitivnimi bakterijami, ki lahko rastejo v tem mediju Staphylococcus aureus, Staphylococcus saprophytic, Enterococcus faecalis, Streptococcus agalactiae, Chorynebacterium SP, Lactobacillus SP In lahko celo gojijo kvasovke, na primer zapletene Candida albicans.

Vendar zaradi kemične sestave okolja ne omogoča rasti nekaterih zahtevnih genitourinarnih patogenov, kot so na primer Neisseria Gonorrhoeae, Gardnerella Vaginalis, med ostalimi.

Temelj s strnjenim agarjem

Medij, ki je oprijet, ima kot vir energijskega ekstrakta mesa, hidroliziranega kazeina in hidroliziranega želatinskega hidroliza. Zagotavljajo hranila za razvoj malo zahtevnih bakterij.

Vsebuje tudi cistin, aminokislino, ki omogoča rast koliform, ki jih je mogoče razlikovati po majhnosti.

Vam lahko služi: dejavniki virulence

Vsebuje tudi kot fermentacijsko laktozo ogljikovih hidratov, zato je ta medij različen, saj lahko razlikuje fermentacijske bakterije laktoznega nefermentacije.

Fermentacijske bakterije obarvajo srednji pH s proizvodnjo kisline, ki razvijejo rumene kolonije, medtem ko bakterije, ki ne fermentirajo.

Fermentacijska reakcija se razkrije zahvaljujoč prisotnosti indikatorja pH, ki je v tem mediju bromotimol modra.

Po drugi strani nizka koncentracija srednjih elektrolitov zavira tipično invazivno rast rodu Proteus, imenovan učinek roja. To ustvarja prednost v zvezi z drugimi mediji, saj omogoča štetje UFC, tudi če je spol prisoten Proteus.

Vendar nizka koncentracija elektrolitov zavira rast nekaterih vrst rodu Shigella, To je pomanjkljivost glede drugih medijev.

Fundacija s sklepnim agarjem (BEVIS)

Obstaja varianta ali sprememba tega medija, ki jo je izdelal Bevis, ki je vključil prvotno sestavo kislinskega fuchsina (Andrade). Enaka deluje skupaj z bromotimol modro, da se razlikuje fermentacijske bakterije od nefermentacije.

Razlika med običajnim in spremenjenim okoljem je barva, ki jo sprejmejo kolonije. V primeru laktoznih fermentacijskih bakterij kolonije pridobijo rdečkasto oranžno barvo z roza ali rdečimi halo, medtem ko ne fermentirajo sivo čeljust.

Prijave

Uporablja se z strjenim agarjem ekskluzivno Za vzorce vzorcev urina. Uporaba tega medija je še posebej pogosta v evropskih laboratorijih, medtem ko se v Ameriki manj uporablja.

Vam lahko služi: amenzalizem: značilnosti, primeri, razlike z dinirizmom

Zbiranje vzorca mora izpolnjevati določene parametre, da dosežejo zanesljive rezultate, vključno z:

Ne jemljete antibiotike pred jemanjem vzorca.

Prednostno vzemite urin prve jutranje uro, saj je bolj koncentriran, kadar ni mogoče jemati vzorca z invazivnimi metodami.

Preden vzamete vzorec.

Zavrzite prvi curek uriniranja in nato postavite posodo.

Zberite med 25 in 30 ml urina v dobro označeni sterilni posodi.

Takoj vzemite laboratorij, obkrožen na ledu.

Obdelan ga je treba pred dvema urama po izdaji ali hladilniku pri 4 ° C največ 24 ur.

Vzorci urina

Vzorec urina je treba razredčiti 1:50.

Za redčenje se obložite 0,5 ml bolniškega urina in razredčite s 24,5 ml sterilne fiziološke raztopine. Izmerite 0,1 ml urina, razredčenega in sejajte s površino z lopatico Drigalski na sklopnem mediju.

To je navedena metoda za štetje kolonij. Zato se uporablja v vzorcih urina, saj je treba rezultate izraziti v UFC/ml.

Za količinsko določitev pridobljenih kolonij nadaljujte na naslednji način: štejte kolonije plošče in pomnožite do 10 in nato s 50. To je količina UFC/ml urina.

Interpretacija

Entitete nad 100.000 UFC/ml -indica Okužba v urinu.

Srečanje pod 1000 UFC/ml- ni okužbe.

Med 1000-10.000 UFC/ml -dudoso, možna kontaminacija, ponovitev vzorca.

Id

Gram je treba narediti za kolonije, gojene v Cledu.

Lahko vam služi: Katalaza: značilnosti, struktura, funkcije, patologije

Na primer, če gre za gram -negativni bacil, bo posejan na agarju MacConkey, kjer je fermentacija ali ne laktoza podkrepljena. Poleg tega je za izvedbo testa oksidaze pritrjen hranljiv agar.

V primeru, da Gram razkriva gram -pozitivne kokosove orehe, je lahko podvržen slanemu manitolskemu agarju in hranljivemu agarju. V slednjem se izvaja test katalaze. Nazadnje, če opazimo kvasovke, jih bomo posejali na agar Sabouraud.

Številni laboratoriji ignorirajo uporabo medija, ki je bil strjevan in raje uporablja samo kri, macconkey in hranljiv agar za sejanje vzorcev urina.

Priprava

V Feloli z liter destilirane vode raztopi 36,2 gr z agarjem s sklepnim prahom. Po 5 minutah počitka segrejte oživljenje agarja in nenehno mešajte, dokler ne vre 1 minuto.

Nato v avtoklavu 15 minut sterilizirate pri 121 ° C. Dokončan čas, umaknite se iz avtoklava in pustite, da se ohladi, dokler ne dosežemo temperature 45 ° C. Nato se na vsakem sterilnem Petriju postreže med 15-20 ml.

Postopek postreženih plošč je treba izvesti znotraj laminarnega pretoka ali pred Bunsenovim vžigalnikom, da se izognete kontaminaciji.

Postrežene plošče se lahko strdi, naroči v obrnjeni obliki in shranijo v hladilnik (2-8 ° C) do uporabe.

Končni pH pripravljenega medija mora biti na 7,3 ± 0,2.

Reference

1. Priporočila za mikrobiološko diagnozo okužbe z urinom. Čil. Infecl. Okreval od Sciela.org.
2. Napol pritrjena. Okreval od Britanaalaba.com.